射波刀治療白血病結(jié)節(jié)的離體細(xì)胞劑量學(xué)研究.pdf

1、目的：通過對離體人慢性髓細(xì)胞性白血病急變期細(xì)胞K562細(xì)胞系進(jìn)行單次不同劑量的照射，比較其在不同時間對細(xì)胞造成的損傷方式以及細(xì)胞對損傷的修復(fù)機(jī)制和效果，得出輻射對K562細(xì)胞的劑量.效應(yīng)關(guān)系和時間.并對臨床應(yīng)用射波刀治療白血病髓外結(jié)節(jié)病灶進(jìn)行初步驗證和療效觀察。 方法：取對數(shù)生長期K562細(xì)胞分別給予0Gy、1Gy、2Gy、3Gy、5Gy、10Gy、15Gy、20Gy6MV-X線照射，并于照射后2小時、24小時、48小時收集細(xì)胞

2、，采用ANNEXIN-V/PI雙染色法流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡百分率變化，PI單染色法流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞周期阻滯情況，并采用MTT比色法和克隆形成法檢測照射后細(xì)胞的生長抑制和活性，綜合以上幾種方法檢測結(jié)果并以SPSS12.0進(jìn)行統(tǒng)計分析，得出不同照射劑量和時間對離體白血病細(xì)胞的殺傷作用方式，以及細(xì)胞對損傷進(jìn)行修復(fù)的能力，最后通過對臨床病例療效分析對所獲實驗室研究結(jié)果進(jìn)行初步驗證。 結(jié)果：1、根據(jù)實驗結(jié)果可將輻射劑量大致分為三個區(qū)間

3、組進(jìn)行比較，分別是低劑量組(1～2Gy)、中等劑量組(3～5Gy)和高劑量組(10～20Gy)： 2、低劑量組細(xì)胞照射后2小時即出現(xiàn)凋亡，且凋亡率隨劑量增加而增加(p<0.05)，凋亡峰出現(xiàn)在照射后24小時，此時出現(xiàn)短暫的S期阻滯，48小時后凋亡率減少，但沒有統(tǒng)計學(xué)意義，細(xì)胞周期逐漸恢復(fù)，細(xì)胞生長無明顯抑制，2周后檢測克隆形成能力強(qiáng)(85％～93％)； 3、中劑量組細(xì)胞照射后2小時即出現(xiàn)細(xì)胞周期S期阻滯，24小時進(jìn)入G2

4、/M期阻滯，48小時后部分恢復(fù)細(xì)胞增殖周期，期間細(xì)胞凋亡率沒有明顯變化(p>0.05)，隨劑量增加凋亡率沒有統(tǒng)計學(xué)差異但總凋亡率高于低劑量組(p<0.05)，72小時后細(xì)胞生長抑制率增加，2周后克隆形成率低(49％～71％)，p值均小于0.05； 4、高劑量組細(xì)胞照射后2小時出現(xiàn)短暫的S期阻滯后進(jìn)入持續(xù)的G2/M期阻滯，同時細(xì)胞凋亡率隨時間延長逐漸增加(p<0.05)，但各劑量點(diǎn)間同一時間點(diǎn)凋亡率無明顯差別(p>0.05)，總凋

5、亡率高于中、低劑量組(p<0.05)，72小時后細(xì)胞生長明顯被抑制(p<0.01)，2周后檢測很少或無克隆形成(0～23％)； 5、臨床應(yīng)用射波刀治療白血病髓外結(jié)節(jié)6～17Gy/1～3f照射后病灶局部控制率達(dá)到100％，耐受良好，無明確治療相關(guān)副作用發(fā)生，但受病例數(shù)較少和隨訪時間不足所限尚未能獲得統(tǒng)計學(xué)檢驗結(jié)果。 結(jié)論：1、K562細(xì)胞經(jīng)1～2GyX線照射后發(fā)生亞致死性損傷，單次照射后48小時后可基本恢復(fù)，損傷隨劑量增加