HSV-ⅠICP22對HCMV主要即刻早期啟動子結(jié)構(gòu)的效應(yīng)分析.pdf

1、人巨細胞病毒(Human cytomegalovirus，HCMV)和單純皰疹病毒(Herpes simDlex Virus，HSV)是同屬于皰疹病毒科、具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的DNA病毒，其所引起的病毒性疾病具有重要的流行病學(xué)意義。同時，由于這類病毒的基因組具有類似于真核細胞的復(fù)雜基因結(jié)構(gòu)，因而在真核基因表達調(diào)控機理的分子生物學(xué)研究和應(yīng)用工作中表現(xiàn)出重要韻意義。 人巨細胞病毒(HLlman cytomegalovirus，HCMV)主要

2、即刻早期(Ma．jorImmediate-Early，MIE)啟動子在HCMV基因表達調(diào)控中起重要作用，并且具有很強的轉(zhuǎn)錄啟動能力，其順式調(diào)控元件在這一區(qū)域形成多次重復(fù)的特殊結(jié)構(gòu)，而這些元件及其組合方式在轉(zhuǎn)錄啟動過程中的生物學(xué)意義尚不清楚。實驗發(fā)現(xiàn)HSV-I即刻早期蛋白ICP22能對多種病毒及細胞啟動子及增強子發(fā)揮極強的轉(zhuǎn)錄抑制作用，但是作為HSV其中一個立即早期蛋白，人們對它的了解相對于其它四個立即早期蛋白還相對較少。因此，本實驗的研

3、究重點是探討HSV-1病毒立即早期基因ICP22對各種真核基因啟動子的抑制作用，并同時利用其對強啟動子H(NV的主要即刻早期(Major Immediate-Early，MIE)的結(jié)構(gòu)進行分析。 實驗利用CAT(氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶)報告基因系統(tǒng)檢測ICP22對各種不同的HCMv即刻早期基因啟動子結(jié)構(gòu)元件及突變體轉(zhuǎn)錄活性的影響，結(jié)果顯示：盡管各種元件在ICP22存在的情況下表現(xiàn)出了各自獨特的轉(zhuǎn)錄效應(yīng)，但它們組合后形成的不同突變體以及