牛泡沫病毒內(nèi)部啟動(dòng)子的克隆、結(jié)構(gòu)和功能分析.pdf

1、牛泡沫病毒(Bovine Foamy Virus,BFV)基因組全長12.0kb,除編碼gag、pol、env三個(gè)結(jié)構(gòu)基因外,在env與3'LTR之間有兩個(gè)重疊的開放閱讀框架ORF-1,ORF-2.其中ORF-1編碼泡沫病毒的反式激活因子(Tas),它可以作用于LTR U3區(qū)的順式調(diào)控位點(diǎn),從而激活轉(zhuǎn)錄.該文以作者實(shí)驗(yàn)室分離并鑒定的BFV<,3026>中國毒株為材料,用PCR方法首次克隆了位于env基因3'端的內(nèi)部啟動(dòng)子,從而證實(shí)了牛泡

2、沫病毒第二類啟動(dòng)子的存在.克隆片須經(jīng)序列分析后,引入luc基因作瞬時(shí)表達(dá)分析.結(jié)果表明該內(nèi)部啟動(dòng)子不但基礎(chǔ)活性高于LTR,而用轉(zhuǎn)錄活性在Tas參與下被大大激活,其激活活性也遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于LTR.BFV中第二類啟動(dòng)子IP的存在反映了泡添病毒基因調(diào)控的復(fù)雜性.LTR調(diào)節(jié)病毒結(jié)構(gòu)蛋白的表達(dá),而內(nèi)部啟動(dòng)子(IP)則起始調(diào)節(jié)蛋白mRNA的轉(zhuǎn)錄.為了對(duì)IP進(jìn)行更精確的定位,該文對(duì)克隆的IP片段進(jìn)行了進(jìn)一步的缺失分析,將完整的IP定位在9117~9405之