ATM在DNA損傷生物學(xué)反應(yīng)中的功能作用研究.pdf

1、該課題一方面依據(jù)p21<'WAF1/CIP1>蛋白分子中存在可磷酸化位點(diǎn),其第134-138位Aa序列為PGDSQ,這一序列完全符合Kim.ST等人篩選ATM激酶特異性底物時(shí),應(yīng)用GST peptide Screening方法中提出的：底物磷酸化位點(diǎn)附近的最佳Aa序列（P/L/I/M）X（L/I/D/E）SQ<'30>;因此,可作為預(yù)測(cè)磷酸化位點(diǎn)（preliminary phosphorylation site）的基序（motif）開展

2、試驗(yàn)研究,檢測(cè)ATM與p21<'WAF1/CIP1>早期活化相關(guān)性,并進(jìn)一步探討ATM可否通過直接磷酸化修飾p21<'WAF1/CIP1>參與p21<'WAF1/CIP1>的早期活化過程.另一方面,利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選與ATM的亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域及脯氨酸富含區(qū)的相互作用的蛋白,克隆,篩選,分析功能相關(guān)的重要蛋白.探討ATM超始、調(diào)控?fù)p傷監(jiān)視網(wǎng)絡(luò)的分子基礎(chǔ).該課題的創(chuàng)新之處在于研究證明：IR早期ATM調(diào)控p53不依賴的p21<'WAF1/

3、CIP1>蛋白的活化過程.IR可誘導(dǎo)ATM與p21<'WAF1/CIP1>分子的相互作用;IR活化的ATM具磷酸化p21<'WAF1/CIP1>的功能,此磷酸化功能可被PI3K家族特異性抑制劑Wortmannin所抑制.揭示DNA損傷反應(yīng)中ATM極有可能通過直接磷酸化p21<'WAF1/CIP1>,在IR發(fā)生早期參與p21<'WAF1/CIP1>的快速活化,進(jìn)而調(diào)控細(xì)胞周期檢查點(diǎn).該論文為闡明ATM在損傷監(jiān)視網(wǎng)絡(luò)中調(diào)控細(xì)胞周期檢查點(diǎn)的分