羰-氨反應(yīng)在老年色素形成中的共性表征及巰基化合物對(duì)其的清除.pdf

1、根據(jù)Yin and Brunk于1995年提出的羰基毒化衰老學(xué)說(shuō)，羰基反應(yīng)所導(dǎo)致的生物大分子交聯(lián)過(guò)程是積累性衰老損變的核心過(guò)程甚至衰老的本質(zhì)。在體內(nèi)，由自由基氧化和非酶糖基化等多種生化副反應(yīng)所產(chǎn)生的不飽和醛酮類物質(zhì)與體內(nèi)各種物質(zhì)的氨基結(jié)合，并進(jìn)一步重排，形成難解難溶的老年色素類色素基團(tuán)或熒光物質(zhì)。本文討論了衰老的自由基學(xué)說(shuō)、糖基化學(xué)說(shuō)以及在其基礎(chǔ)上根據(jù)老年色素的形成機(jī)制發(fā)展而成的羰基毒化衰老學(xué)說(shuō)。由于羰氨交聯(lián)反應(yīng)是各種老年色素形成的核心

2、生化機(jī)制，因此我們探討了體內(nèi)不同組織內(nèi)產(chǎn)生的人造老年色素的熒光共性。在此基礎(chǔ)之上，通過(guò)對(duì)多種老年色素生成體系的研究進(jìn)一步尋找去除老年色素的方法，并初步解釋了其發(fā)生機(jī)制。 本學(xué)位論文主要從羰基應(yīng)激產(chǎn)物的共性和去除羰基應(yīng)激產(chǎn)物兩個(gè)方面展開研究： 一、對(duì)來(lái)自大鼠不同組織的人造老年色素進(jìn)行比較研究，并將其與MDA-BSA體系和MDA-DNA體系產(chǎn)生的老年色素進(jìn)行對(duì)比。使用改進(jìn)的熒光技術(shù)對(duì)來(lái)自大鼠肝臟、腦、心臟和腎臟組織的人造老年

3、色素進(jìn)行了研究。組織樣品經(jīng)過(guò)紫外照射后，在熒光顯微鏡不同激發(fā)塊下，都發(fā)出了相似的熒光。使用熒光分光光度計(jì)對(duì)其三維熒光地形圖進(jìn)行檢測(cè)也發(fā)現(xiàn)了它們具有相似的老年色素類熒光峰。對(duì)相對(duì)簡(jiǎn)單的體系，即MDA與小牛血清白蛋白(BSA)或DNA反應(yīng)的體系，也進(jìn)行了3D熒光的檢測(cè)。結(jié)果顯示，不同組織或生物大分子材料在加速了氧化/羰基應(yīng)激的環(huán)境下具有相似的命運(yùn)。 二、研究含巰基化合物對(duì)老年色素類熒光物質(zhì)的清除作用。不飽和羰基類化合物來(lái)源于自由基對(duì)

4、脂類物質(zhì)的攻擊或美拉德反應(yīng)(糖基化)。這些小分子與體內(nèi)氨基特別是蛋白質(zhì)側(cè)鏈氨基發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)并進(jìn)一步發(fā)生重排形成老年色素。我們檢測(cè)了一些巰基化合物后發(fā)現(xiàn)，它們能部分地降解老年色素類熒光物質(zhì)，其中GSH效果最顯著。而且，在這一過(guò)程中沒(méi)有形成新的熒光峰。我們的結(jié)果顯示，老年色素有可能在溫和的條件下被降解。 綜上所述，通過(guò)對(duì)不同組織和生物材料的研究證明，各種老年色素的生成可能遵循相似的生化途徑并具有類似的發(fā)光基團(tuán)，這為我們通過(guò)較為簡(jiǎn)單的