螺旋藻的酶解利用研究.pdf

1、機(jī)體衰老可引起多種疾病，而自由基過(guò)剩被普遍認(rèn)為是引起衰老的主要原因(如動(dòng)脈粥樣硬化、心血管疾病、腦神經(jīng)細(xì)胞變性及腫瘤等)。目前多數(shù)抗衰老藥物為化學(xué)合成藥品，有實(shí)踐證明:服用過(guò)多的合成藥物抗衰老會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒副作用，因此，尋找天然抗氧化劑延緩衰老對(duì)人類(lèi)健康具有重大意義。
　　藻類(lèi)是一種含量豐富、分布廣泛的天然資源，含有大量營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高的微量元素。在藻類(lèi)中提取的抗氧化劑具有抗氧化作用強(qiáng)、種類(lèi)豐富、副作用低等優(yōu)點(diǎn)，而且有研究表明螺旋藻和

2、藻膽蛋白具有抗氧化活性，能抑制機(jī)體內(nèi)自由基積累，延緩機(jī)體衰老，抑制腫瘤的發(fā)生，并具有降血壓活性。另外國(guó)內(nèi)外已有報(bào)道稱(chēng)從不同藻類(lèi)酶解液中得到具有明顯降血壓作用，抗氧化作用，抗增殖等能力的活性肽。因此合理開(kāi)發(fā)和利用藻類(lèi)并提高其應(yīng)用價(jià)值具有廣泛的發(fā)展前景，對(duì)人類(lèi)抗衰老工程具有極其重要的意義。本論文以鈍頂螺旋藻(Spirulina platensis)為研究對(duì)象，圍繞其高值化開(kāi)發(fā)利用這一研究主題進(jìn)行研究，結(jié)果如下:
　　螺旋藻為實(shí)驗(yàn)室養(yǎng)殖

3、，將螺旋藻收集后清洗，與磷酸鹽緩沖液混合后經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融得到螺旋藻粗蛋白提取液，運(yùn)用蛋白酶SM98011酶解螺旋藻粗蛋白粗提液得到抗氧化活性增強(qiáng)的產(chǎn)物，提高了螺旋藻的應(yīng)用價(jià)值。酶解螺旋藻蛋白粗提液采用的反應(yīng)體系為螺旋藻蛋白粗提液、蛋白酶SM98011、磷酸鹽緩沖液體系，在50℃下酶解5h后將蛋白酶滅活，離心后通過(guò)α-脫氧核糖法測(cè)定酶解產(chǎn)物清除自由基的能力為33.28％，較未酶解樣品的12.15％有明顯增強(qiáng)。另外將螺旋藻粗蛋白酶解液及未酶解

4、樣品在經(jīng)過(guò)氨基水楊酸沉淀及鹽酸全水解后進(jìn)行氨基酸分析，發(fā)現(xiàn)二者氨基酸組成有顯著差異。
　　通過(guò)凝膠過(guò)濾層析柱Sephadex G-15(1.6×80cm，medium Pharmacia)對(duì)酶解液進(jìn)行初步分離，得到5個(gè)分離峰，經(jīng)過(guò)對(duì)其抗氧化活性測(cè)定發(fā)現(xiàn)峰3具有較高的抗氧化活性，為26.82％。對(duì)峰3進(jìn)行反復(fù)收集，凍干濃縮后由高壓液相色譜對(duì)酶解液中的抗氧化成分進(jìn)行進(jìn)一步分離純化，得到a-j十個(gè)分離峰，經(jīng)測(cè)峰d抗氧化活性最高為:13.

5、42％。對(duì)峰d反復(fù)收集濃縮，利用質(zhì)譜分析對(duì)其氨基酸序列組成進(jìn)行了解析，初步得出抗氧化活性肽的氨基酸組成可能為L(zhǎng)AHICGVP。
　　藻類(lèi)蛋白資源是潛在的天然藥物與食品資源，而螺旋藻是其中研究較多的一種高價(jià)值藻類(lèi)。關(guān)于螺旋藻的報(bào)道多體現(xiàn)在其降血壓活性以及其作為自然食品所具有的豐富營(yíng)養(yǎng)，較少有關(guān)于從螺旋藻粗蛋白的酶解液中提取關(guān)于抗氧化活性的物質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)從抗氧化出發(fā)，對(duì)螺旋藻粗蛋白酶解液的清除自由基能力進(jìn)行了測(cè)定，為今后關(guān)于螺旋藻及其他