煙酰胺、四環(huán)素和氨苯砜治療大皰性類天皰瘡的分子機(jī)制初探.pdf

1、本文從BP患者血清中趨化因子的檢測；BP抗體對角質(zhì)形成細(xì)胞分泌趨化因子及凋亡的影響；煙酰胺、四環(huán)素和氨苯砜治療BP的可能分子機(jī)制進(jìn)行探討：共分三章： 第一章BP患者血清趨化因子的檢測。 目的：探討B(tài)P發(fā)病中CC型趨化因子家族中嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(eotaxin)、調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌的細(xì)胞因子(RANTES)、單核細(xì)胞趨化蛋白(MCP)-1和巨噬細(xì)胞炎癥蛋白(MIP)-1α以及CXC型趨化因子白細(xì)胞介素(IL)-

2、8的作用。 方法：采用雙抗體夾心ELISA法檢測28例活動期BP患者與30例正常人對照血清中eotaxin、RANTES、MCP-1、MIP-la和IL-8水平。 結(jié)果：BP患者血清中eotaxin、MCP-1和IL-8水平明顯高于正常人，患者血清中RANTES和MIP-la水平與正常人比較差異無顯著性。 結(jié)論：BP發(fā)病中存在趨化因子的異常，eotaxin、MCP-1和IL-8可能與BP的發(fā)病有關(guān)。 第二

3、章BP IgG對角質(zhì)形成細(xì)胞分泌趨化因子及凋亡的影響。 目的：檢測BP IgG與角質(zhì)形成細(xì)胞靶抗原結(jié)合后一些關(guān)鍵趨化因子的釋放情況，以及BP IgG對角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡的影響。 方法：應(yīng)用辛酸-硫酸胺法從BP患者皰液中純化IgG，采用免疫比濁法和SDS-PAGE法測定純化后IgG的濃度和純度，并用BPl80ELISA試劑盒鑒定皰液純化前后的免疫活性。將純化的BPIgG與角質(zhì)形成細(xì)胞共同作用，用雙抗體夾心EUSA方法檢測培養(yǎng)

4、上清液中eotaxin、MCP-1和IL-8的表達(dá)情況。應(yīng)用Annexin V-FITC凋亡檢測試劑盒檢測BP IgG對角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果：采用辛酸一硫酸胺法，從BP患者皰液中純化IgG的回收率為51.4％，略低于正常人血清，但兩者純度均較高。且BP患者皰液純化前后的免疫活性不變。純化的BP IgG以時間依賴方式、濃度依賴方式刺激角質(zhì)形成細(xì)胞分泌IL-8。BP IgG不引起角質(zhì)形成細(xì)胞的凋亡。 結(jié)論：采用辛酸

5、一硫酸胺法從BP患者皰液中純化IgG簡便可行、純度高，不影響免疫活性。BP IgG能刺激角質(zhì)形成細(xì)胞分泌IL-8，可能參與BP的發(fā)病。 第三章煙酰胺、四環(huán)素和氨苯砜治療BP的分子機(jī)制初探。 目的：探討氨苯砜、煙酰胺和四環(huán)素治療BP的抗炎作用的可能分子機(jī)制。 方法：以4mg/ml的BP IgG與角質(zhì)形成細(xì)胞共同培養(yǎng)24h，孵化前分別用不同濃度氨苯砜、煙酰胺、四環(huán)素進(jìn)行干預(yù)。MTT法檢測各組藥物對細(xì)胞增殖的影響.雙抗