結締組織生長因子促進半月板無血管區(qū)損傷愈合.pdf

1、目的：探討結締組織生長因子(CTGF)對纖維軟骨細胞外基質分泌、VEGF表達與促進半月板無血管區(qū)損傷修復中的作用，為臨床應用提供理論基礎和實驗依據(jù)。
　　方法：將新西蘭大白兔半月板白區(qū)，經(jīng)膠原酶消化、離心分離后，提取半月板纖維軟骨細胞，培養(yǎng)至第2代。用流式細胞儀鑒定該細胞表面CD44，CD45和CD105標志物，并用11型膠原抗體做免疫細胞化學鑒定，以證明所培養(yǎng)、傳代的細胞是纖維軟骨細胞。分別將細胞在濃度為lOOng／ml的CTG

2、F培養(yǎng)基中培養(yǎng)3天和14天后，通過實時定量聚合酶鏈反應，檢測I型膠原、11型膠原和VEGF基因的表達變化情況。將45只大白兔隨機分為3組，在兔半月板無血管區(qū)，制作長3mm的縱形撕裂。處理方式為：單純半月板縫合術、縫合術+填充PBS-纖維蛋白膠，縫合術+填充1，5ugCTGF-纖維蛋白膠。術后第1周、4周、10周，用熒光免疫組織化學分析法，顯示I型膠原、11型膠原和VEGF在損傷處的表達與分布情況，直觀撕裂處的愈合情況。
　　結果：

3、體外實驗第14天，定董RT-PCR結果顯示，lOOng／mlCTGF組中的I型膠原，II型膠原和VEGFmRNA表達比PBS對照組，分別增加了2，38+O，63倍，2，96+0.87倍，2，14+0，56倍（統(tǒng)計學均有顯著性差異）。體內(nèi)試驗的熒光免疫組織化學結果顯示，在術后第10周，CTGF治療組中的I型膠原，II型膠原和VEGF已完全填充撕裂損傷處。PBS-蛋白膠組中，損傷處仍有明顯裂隙。
　　結論：CTGF可促進半月板無血管區(qū)