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文檔簡(jiǎn)介
1、本試驗(yàn)通過(guò)H.E.染色觀察腹瀉仔豬胃腸道病理變化,和免疫組織化學(xué)染色觀察斷奶后PAR.2在正常與腹瀉仔豬體內(nèi)的分布及量的變化規(guī)律,研究PAR-2與斷奶仔豬腹瀉之間的關(guān)系。 方法:取斷奶仔豬的胃腸道,按照組織學(xué)特性分別分組為:胃賁門(mén)區(qū)、胃底區(qū)、胃幽門(mén)區(qū),十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、盲腸段。進(jìn)行多聚甲醛固定,常規(guī)包埋,4岬切片。同時(shí),無(wú)菌取腸道內(nèi)容物作微生物學(xué)病原菌的分離鑒定。健康仔豬組織作對(duì)照,運(yùn)用免疫組織化學(xué)原理,各組織石蠟切片
2、用山羊抗人PAR-2多克隆抗體作一抗,進(jìn)行SABC法染色,觀察組織內(nèi)PAR-2定位部位,并同步進(jìn)行H.E.染色,鏡檢拍照比較分析。 結(jié)果表明: 1.腹瀉仔豬部分組織有干酪樣病變,全身漿膜有不同程度的出血點(diǎn),胃腸道內(nèi)容物稀薄,粘膜表面覆著大量粘液,腸壁厚薄不均,彈力下降;培養(yǎng)分離鑒定致病菌為傷寒沙門(mén)氏菌; 2.HE染色觀察,病理組織學(xué)變化主要表現(xiàn)為粘膜上皮細(xì)胞脫落變性,腸壁平滑肌變薄,固有層內(nèi)中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)
3、胞、淋巴細(xì)胞等浸潤(rùn)、水腫,粘膜下層淋巴小結(jié)增生,分別表現(xiàn)出不同的炎癥程度。 3.運(yùn)用免疫組織化學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)仔豬胃腸道廣泛的表達(dá)PAR-2,特別在粘膜上皮細(xì)胞的頂端,腺細(xì)胞的基底部,血管上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞等,所設(shè)對(duì)照組均未見(jiàn)陽(yáng)性反應(yīng);并且,PAR-2在腹瀉仔豬比正常仔豬的表達(dá)增加,特別是炎性細(xì)胞的強(qiáng)表達(dá)。 綜上所述,PAR-2在胃腸道廣泛存在,小腸表達(dá)量略低;同時(shí)發(fā)病初期炎癥細(xì)胞強(qiáng)表達(dá),提示PA
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