職業(yè)緊張和TNF-α基因多態(tài)性與血清TNF-α水平關(guān)系的研究.pdf

1、背景與目的:在當(dāng)今社會(huì),人們的工作節(jié)奏加快、交往擴(kuò)大、競(jìng)爭(zhēng)加劇、壓力加大,職業(yè)中的應(yīng)激現(xiàn)象越來(lái)越突出。雖然職業(yè)緊張不象生物、物理或化學(xué)因素那樣可造成特定的職業(yè)病,但卻可以以非特異性的方式來(lái)?yè)p害身體健康,過(guò)度應(yīng)激會(huì)導(dǎo)致疲乏、焦慮、壓抑、免疫功能變化和工作能力下降等,甚至誘發(fā)疾病。根據(jù)現(xiàn)代緊張理論,下丘腦—垂體—腎上腺(hypothalamic-pituitary-adrenocorticalaxis,HPA axis)系統(tǒng)是應(yīng)激影響免疫系

2、統(tǒng)機(jī)制中的一個(gè)重要組成部分,其激活的程度取決于許多因素且存在明顯的個(gè)體差異,個(gè)體對(duì)應(yīng)激事件的應(yīng)對(duì)能力起著決定性作用。目前已有的實(shí)驗(yàn)證實(shí),應(yīng)激反應(yīng)中,巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞可被激活而釋放前炎癥細(xì)胞因子,主要的前炎癥細(xì)胞因子有白細(xì)胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF),它們不僅本身可以調(diào)節(jié)免疫,而且還可以作用于

3、腦,誘發(fā)HPA軸的激活,進(jìn)而影響機(jī)體的免疫功能。隨著細(xì)胞分子生物學(xué)的深入發(fā)展,從遺傳的角度來(lái)探討個(gè)體對(duì)應(yīng)激反應(yīng)的差異,使職業(yè)緊張易感性的研究從行為水平深入到分子水平已成為必然趨勢(shì)。由于這種遺傳背景的差異可能會(huì)涉及到眾多的遺傳因素,是一種多基因綜合作用的結(jié)果,而國(guó)內(nèi)外對(duì)于此尚未見(jiàn)任何報(bào)道,在目前情況下,只能從與神經(jīng)一免疫系統(tǒng)關(guān)系最為密切的3種細(xì)胞因子展開(kāi)研究。單核苷酸多態(tài)性是人類(lèi)DNA變異中最常見(jiàn)的形式,約占其90％,被認(rèn)為是最有價(jià)值的遺

4、傳標(biāo)記。本文通過(guò)對(duì)大量文獻(xiàn)的歸納分析,初步篩選出TNF-A基因-308位點(diǎn)和-238位點(diǎn),旨在了解TNF-A基因-308位點(diǎn)和-238位點(diǎn)G/A單核苷酸多態(tài)性在職業(yè)緊張引起TNF-α水平變化中所起的作用,以TNF-α為指標(biāo),來(lái)探討職業(yè)緊張與機(jī)體免疫功能的關(guān)系。
　　研究對(duì)象與方法：研究對(duì)象采用整群抽樣的方法抽取河南省某電器廠流水線作業(yè)工人178名進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查,實(shí)際回收有效問(wèn)卷166份,其中男性123份,女性43份,樣本有效回收率9

5、3.3%,使用職業(yè)緊張測(cè)試量表(包括緊張因素量表、緊張反應(yīng)量表、個(gè)性特征量表、緊張緩解因素量表)測(cè)試其職業(yè)緊張因素、緊張反應(yīng)、個(gè)性特征和緊張緩解因素,以付出-回報(bào)失衡(effort-reward imbalance model,ERI)評(píng)價(jià)職業(yè)緊張水平〔ERI=付出/(回報(bào)×0.5454)〕,按ERI比值的上四分位數(shù)為界限,低于此界限的為低緊張組,其余為高緊張組。研究方法:1問(wèn)卷調(diào)查每位研究對(duì)象均接收問(wèn)卷調(diào)查,內(nèi)容包括:一般情況調(diào)查、健

6、康檢查、職業(yè)緊張因素測(cè)評(píng)、相關(guān)職業(yè)緊張反應(yīng)測(cè)評(píng)、個(gè)性特征測(cè)評(píng)、緊張緩解因素測(cè)評(píng)等。2實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)首先進(jìn)行血樣采集:全部研究對(duì)象抽取清晨空腹肘靜脈血5ml,抽血后迅速打入含有肝素的一次性真空抗凝管中,震蕩混勻、分裝。一部分進(jìn)行血清分離后置于-4℃冰盒中運(yùn)回,進(jìn)行TNF-α的檢測(cè),另一部分直接運(yùn)回置于-40℃冰箱準(zhǔn)備分子生物學(xué)研究。2.1 TNF-α—308位點(diǎn)和—238位點(diǎn)基因多態(tài)性檢測(cè)(1)DNA提取采用DNA提取試劑盒提取DNA。(2)

7、PCR-RFLP通過(guò)DNA聚合酶鏈反應(yīng)對(duì)包含TNF-α—308和—238多態(tài)性位點(diǎn)的2條DNA片段進(jìn)行擴(kuò)增,限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)分析技術(shù)鑒定其基因型。2.2血清TNF-α濃度的檢測(cè)采用放射免疫法測(cè)血清中TNF-α濃度,實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用Excel2000對(duì)全部調(diào)查和測(cè)定結(jié)果建立數(shù)據(jù)庫(kù),SPSS12.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05(雙側(cè))。
　　結(jié)果:1以文化程

8、度作為協(xié)變量的協(xié)方差分析結(jié)果表明,內(nèi)控性工作心理控制源對(duì)血清TNF-α濃度有影響(P=0.021)、內(nèi)驅(qū)力對(duì)血清TNF-α濃度亦有影響(P=0.016),且與文化程度無(wú)關(guān),結(jié)果也顯示,內(nèi)控性工作心理控制源評(píng)分越低血清TNF-α濃度越低,內(nèi)驅(qū)力評(píng)分越低血清TNF-α濃度亦越低。Spearman相關(guān)分析顯示,血清TNF-α濃度與角色模糊(r=-0.167,P=0.035),決定自由度(r=-0.168,P=0.034)評(píng)分呈負(fù)相關(guān),而與其他

9、職業(yè)緊張因素、緊張反應(yīng)、個(gè)性特征和緊張緩解因素變量無(wú)相關(guān)關(guān)系(P>0.05),血清TNF-α濃度與性別(r=-0.183,P=0.021)、職稱(chēng)(r=-0.225,P=0.009)、職業(yè)(r=-0.160,P=0.044)呈負(fù)相關(guān),而與其他如年齡、婚姻狀態(tài)等無(wú)相關(guān)關(guān)系(P>0.05)。多元逐步回歸分析結(jié)果顯示,應(yīng)付策略、角色模糊、心理需求/決定自由度和付出/回報(bào)失衡進(jìn)入了回歸方程,是血清TNF-α濃度的預(yù)測(cè)因子。2 t檢驗(yàn)結(jié)果表明,攜帶

10、A等位基因的工人中血清TNF-α濃度高于攜帶G等位基因的工人,但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),提示基因型對(duì)血清TNF-α濃度無(wú)影響。3卡方檢驗(yàn)結(jié)果表明,兩個(gè)緊張組間TNF-α(—308)位點(diǎn)A等位基因型分布頻率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x~2=0.0001,P=1.0),提示該位點(diǎn)多態(tài)性與本研究對(duì)象職業(yè)緊張的遺傳易感性無(wú)關(guān);TNF-α(—238)位點(diǎn)兩個(gè)緊張組間A等位基因型分布頻率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x~2=5.449,P=0.020),提示