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文檔簡介
1、骨髓造血組織功能抑制是腫瘤放療與化療的常見的副作用,也是高劑量核輻射事故的首要死亡原因,臨床上表現(xiàn)為急性和慢性骨髓抑制。急性骨髓抑制即刻出現(xiàn)嚴重的癥狀,導致輻射事故受害者與放療患者的死亡,或者使腫瘤放療病人的病情惡化。慢性骨髓抑制起病隱匿,病情遷延并且難以康復,而且,由于臨床對急性骨髓抑制的治療掩蓋這種難以逆轉的骨髓損傷。由于骨髓功能抑制難以治愈,急需對其發(fā)病機制進行研究,為骨髓功能抑制的有效治療與預防提供依據(jù)。眾多證據(jù)表明造血細胞凋亡
2、引發(fā)急性骨髓抑制,而造血干細胞的衰老被認為是骨髓長期抑制的主要原因,多項研究表明電離輻射激活p38 MAPK誘導造血細胞凋亡和衰老。
本研究以p38 MAPK的特異性抑制劑SB203580為研究對象,研究其對全身照射小鼠造血細胞的輻射保護作用,并初步探討其作用的機制。包括三部分實驗:1)SB203580對造血祖細胞和造血干細胞保護作用的觀察:小鼠隨機分為對照組、照射組及SB203580給藥組,以6.0 Gy137Csγ射線
3、全身均勻照射SB203580給藥組和照射組的C57BL/6小鼠。收集并計數(shù)外周血紅細胞、白細胞和血小板,以及單側股骨骨髓有核細胞;骨髓細胞半固體培養(yǎng)法檢測骨髓有核細胞增殖能力,卵石樣造血集落形成實驗檢測造血干細胞增殖能力。2)SB203580的抗氧化作用:收集小鼠骨髓有核細胞,分組同上,照射組與SB203580給藥組細胞進行1Gy體外照射,照射之后孵育過夜,酶標儀檢測細胞內活性氧水平。3)SB203580對造血干細胞樣細胞p16 mRN
4、A表達的影響:磁珠分離小鼠系標記陰性骨髓造血細胞,分為對照組、照射組、照射+放線菌素D組、照射+SB203580組、照射+SP600125組,細胞照射劑量為4Gy。培養(yǎng)后去除懸浮細胞,消化貼壁細胞后重新貼壁取非貼壁細胞為干細胞樣細胞,提取RNA,Real-time PCR檢測p16與p21 mRNA的表達情況。
本研究觀察到SB203580給藥組外周血白細胞、血小板的數(shù)量分別比照射組高111.8%和157.7%(P<0.0
5、5); SB203580給藥組骨髓有核細胞較照射組組高135.4%,CFU—GM升高188.5%(P<0.05),CAFC陽性細胞形成率較照射組高146.6%(P<0.01)。SB203580處理組體外受照骨髓有核細胞內活性氧較照射組低56.2%(P<0.05);放線菌素D可部分抑制p16mRNA表達,SB203580處理可完全抑制p16 mRNA升高。
綜上所述,SB203580對照射造成的小鼠造血組織損傷具有一定的保護
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