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文檔簡介
1、放療是當今治療惡性腫瘤最常用的方法之一,但是放射線在殺傷腫瘤細胞的同時,對機體正常免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)的影響不可忽視。已經(jīng)證實輻射所致的免疫系統(tǒng)損傷有兩大顯著特點,一是早期損傷嚴重,表現(xiàn)在低劑量照射后即可引起淋巴器官的明顯損傷;二是后期恢復緩慢,雖然淋巴器官的組織學結(jié)構基本恢復,然而淋巴細胞數(shù)量仍然明顯低于正常水平,特別是外周血淋巴細胞一直維持在較低水平。輻射(1-7Gyγ射線)對造血系統(tǒng)的影響主要表現(xiàn)在骨髓造血抑制、骨髓基質(zhì)出血水腫及造
2、血微環(huán)境的紊亂,從而導致放療患者免疫力低下,易出現(xiàn)感染、出血等并發(fā)癥。 血小板第4因子(PF4)屬于CXC類趨化因子家族成員,最初的研究集中在其可能的促凝血作用,然而后來的體外研究描述了一些其他表面上不相關的生物功能,包括抑制血管新生和調(diào)節(jié)造血干/祖細胞增殖,促進中性粒細胞的粘附性等,因此被稱作是趨化因子之謎。先前的研究已經(jīng)證實PF4不僅能延長輻射損傷小鼠的生存時間,增加小鼠的存活率,加速體內(nèi)粒-巨噬系集落形成單位(CFU-GM
3、)的恢復,而且能保護經(jīng)環(huán)磷酰胺(CTX)預處理小鼠骨髓的造血功能,減輕CTX對胸腺、脾臟細胞的損傷,說明PF4對小鼠造血系統(tǒng)有明確的放化療保護作用。本實驗基于實驗室原有實驗結(jié)果的基礎上,進一步研究PF4對急性輻射損傷小鼠免疫系統(tǒng)及骨髓細胞的保護作用,并對其保護機制進行初步探討。 目的:探討PF4對急性輻射損傷小鼠免疫系統(tǒng)及骨髓細胞的保護作用,并對其保護機制進行初步探討。 方法:雄性BALB/c小鼠隨機分為三組:第Ⅰ組(照
4、射組)、第Ⅱ組(PF4+照射組)、第Ⅲ組(正常對照組)。PF4+照射組在照射前26h及20h腹腔注射PF440μg·kg-1,前兩組全身一次性60Co-γ射線照射。照射后用瑞氏染色法計數(shù)外周血淋巴細胞百分數(shù)變化;胸腺、脾臟制成細胞懸液計數(shù)后,MTT比色法測定胸腺及脾細胞增殖能力;照射后第1、2、4、8天流式細胞儀測定小鼠骨髓細胞的細胞周期;免疫組化法動態(tài)觀察骨髓基質(zhì)細胞p21蛋白表達水平變化。 結(jié)果:PF4+照射組小鼠外周血淋巴
5、細胞百分數(shù)下降趨勢較照射組明顯減慢。胸腺、脾細胞計數(shù),PF4+照射組明顯高于照射組。淋巴細胞增殖試驗,第Ⅱ組與第Ⅰ組相比,小鼠胸腺及脾細胞的增殖能力明顯增強。流式細胞儀測定細胞周期,G0+G1期細胞百分數(shù)照射后第1、2天的照射組及照射后第1天的PF4+照射組均明顯高于正常對照組,而各時間點的照射組與PF4+照射組之間亦存在明顯差異。照射后第2、8天PF4+照射組的G0+G1期細胞百分數(shù)與正常對照組無明顯差異。免疫組化結(jié)果顯示照射后第2、
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