大鼠氣管異位移植慢性排斥反應(yīng)模型的建立和其與IL-17的關(guān)系.pdf

1、背景:肺移植是治療終末期肺疾病的有效方法,早在1947年mikhov P.Vladimir成功實施了首例肺移植手術(shù),其后在1971年Asimacopoulos和他的同事完成了世界首例大鼠肺移植,從此大鼠肺移植研究逐漸增多。近年來其技術(shù)已逐漸成熟,早起效果獲得肯定,但遠(yuǎn)期生存率仍不理想。1年和5年的生存率僅為79％和52%。這意味著肺移植這種獨特的治療手段伴隨著一系列復(fù)雜的病理生理改變。已知一些免疫和非免疫因素如缺血再灌注性肺損傷、排斥反

2、應(yīng)和閉塞性細(xì)支氣管炎等是導(dǎo)致其預(yù)后不良的主要原因。閉塞性細(xì)支氣管炎(obliterative bronchiolitis,OB)是肺移植遠(yuǎn)期主要并發(fā)癥之一,也是影響肺移植遠(yuǎn)期生存率的主要因素之一,然其發(fā)病機制尚未完全闡明,治療效果有限,因此,建立相應(yīng)動物模型,從而進(jìn)行相關(guān)研究很有必要。
　　目前OB動物模型主要以原位或異位氣管移植,兩者各有利弊。1953年成功用狗建立了氣管移植模型,1984年Klein-Szanto AJ利用大鼠

3、氣管異位移植模型研究上呼吸道粘膜的毒性和幾種化合物的致癌作用。大量實驗證明異位氣管移植比原位氣管移植跟適合于對OB的研究。異位氣管移植比原位氣管移植操作更簡便,對外界干擾因素更少,缺點在于移植的氣管不是正常生理氣道。有報道在術(shù)后30天出現(xiàn)完整的閉塞性細(xì)支氣管炎,異位氣管移植異位氣管移植模型中,大鼠或者小鼠的氣管段被埋入皮下、網(wǎng)膜內(nèi)或者頸部,而在頸部異位氣管移植模型中的最重要的特征是同種免疫相關(guān)性的病理過程。由于頸部微環(huán)境與正常氣道微環(huán)境

4、相近,且環(huán)境相對封閉獨立,消除了外界干擾因素對移植氣道的影響,能更好的表達(dá)供體對移植氣道的炎性反應(yīng)。故本實驗采用(wistar、SD)大鼠種系建立頸部異位氣管移植OB模型,并對其病理過程進(jìn)行觀察和描述。
　　目前IL-17作為一種重要的促炎因子,在其他領(lǐng)域(如非小細(xì)胞肺癌)有了非常深入的研究,但其在氣管移植所形成的慢性排斥反應(yīng)中的研究開展較少,其激活炎癥的機制仍不明朗,有必要對其進(jìn)行初步的研究。
　　目的:利用國內(nèi)常見兩種大

5、鼠種系的氣管異位移植建立慢性排斥反應(yīng)模型并測定不同階段的IL-17表達(dá)。
　　方法:供受體質(zhì)量配對,Wistar和SD大鼠隨機分為2組(n=20?組),A組:Wistar(供體)→SD(受體);B組:SD(供體)→SD(受體),頸前皮下組織包埋移植氣管,不同時間點分別采樣,行組織病理學(xué)分析,對比觀察移植氣管上皮丟失、淋巴細(xì)胞計數(shù)及無核軟骨細(xì)胞/骨細(xì)胞總數(shù)、IL-17表達(dá)量等指標(biāo)。
　　結(jié)果:兩組大鼠全部存活。病理切片示,在第

6、7、14、28天,A、B組淋巴細(xì)胞計數(shù)分別為(9.40±1.71)個HPF、(28.80±1.54)個HPF、(31.50±1.95)個?HPF及<8個HPF;無核軟骨細(xì)胞/骨細(xì)胞總數(shù)比值分別為:〔(47.53%±1.38%)vs(47.93%±1.03%),(p>0.05)〕,〔(81.83%±1.52%)vs(47.60%±1.04%),(p<0.05)〕,〔(86.98%±1.71%)vs(47.14%±1.09%),(p<0.0

7、5)〕;A組上皮丟失度分別為45%,100%,100%。A組閉塞性細(xì)支氣管炎發(fā)生率高于B組(P=0.000)。實驗組IL-17在第7、14、28天表達(dá)量分別為(N=20,10.40±2.31)、(N=20,20.99±5.11)、(N=20,91.64±11.49),對照組IL-17表達(dá)量為(N=20,10.05±1.67)、(N=20,21.10±2.87)、(N=20,17.60±2.08)。
　　結(jié)論:成功建立了Wistar