糖尿病肺組織超微結(jié)構(gòu)病理改變及AGEs、SP-A的免疫組織化學(xué)檢測和分析.pdf

1、目的:糖尿病(DM)是一組以血糖增高為特征的代謝綜合征，可以影響到機(jī)體的各個(gè)組織器官。目前，人們對(duì)DM引起的心、腦、腎、視網(wǎng)膜、神經(jīng)等系統(tǒng)的慢性并發(fā)癥進(jìn)行了大量研究，但對(duì)于DM引起的慢性肺損害的認(rèn)識(shí)尚不深入。近年來，隨著對(duì)糖尿病慢性并發(fā)癥發(fā)生機(jī)制研究的不斷深入，糖尿病肺損害逐漸引起人們的重視。糖尿病性肺損害是指由糖尿病本身所引起的肺臟(包括胸膜)機(jī)能和病理改變。病理改變包括肺實(shí)質(zhì)和肺間質(zhì)。國內(nèi)外學(xué)者對(duì)糖尿病患者肺功能的改變進(jìn)行了大量的研

2、究，但對(duì)糖尿病肺功能損害的病理及機(jī)制研究較少。在長期高血糖毒性引起組織損傷的機(jī)制中，晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)增高與DM多種慢性并發(fā)癥的始動(dòng)及發(fā)展有密切關(guān)系，被認(rèn)為是引起DM組織損傷的重要原因之一。本研究通過對(duì)糖尿病患者肺組織的超微病理結(jié)構(gòu)的觀察，以及鏈脲佐菌素致糖尿病大鼠動(dòng)物模型觀察糖尿病大鼠肺組織AGEs、肺表面活性物質(zhì)蛋白質(zhì)A(SP-A)表達(dá)的變化，探索糖毒性引起肺組織損傷的病理改變及可能的機(jī)制。 方法: 1、

3、利用透射電鏡觀察10例2型糖尿病合并肺癌患者遠(yuǎn)離癌腫組織周圍的肺組織活檢標(biāo)本。 2、建立實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠模型后第4周、12周、20周末，殺檢取肺組織，10％(體積分?jǐn)?shù))福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋切片。采用免疫組織化學(xué)法檢測AGEs、SP-A在糖尿病大鼠肺組織中的表達(dá)變化，用HMIAS型彩色醫(yī)學(xué)圖文分析系統(tǒng)對(duì)免疫組化學(xué)染色切片進(jìn)行圖像測量、修正和分析，測定平均灰度值，并同對(duì)照組進(jìn)行比較。 結(jié)果: 1、糖尿病患者的肺

4、組織超微病理顯示：肺泡Ⅱ型細(xì)胞變圓變小，表面光滑、微絨毛減少乃至消失；嗜鋨性板層小體萎縮，失去板層狀結(jié)構(gòu)，形成一高密度核心團(tuán)塊；細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有長桿狀空隙，可見線粒體基質(zhì)及嵴大部溶解，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體均呈囊性擴(kuò)張為圓形或梭形，呈現(xiàn)透明均質(zhì)狀結(jié)構(gòu)；細(xì)胞核扭曲變形，有多個(gè)核內(nèi)陷，偶爾核內(nèi)可見不規(guī)則空白透亮區(qū)：可見次級(jí)溶酶體增多。肺泡Ⅰ型細(xì)胞萎縮，細(xì)胞質(zhì)可見透明區(qū)。微血管狹窄閉塞，其內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)可觀察到較大的自噬泡，泡內(nèi)含高電子密度的自噬殘?jiān)w粒。

5、肺泡上皮與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的基膜彌漫性增厚，呈洋蔥皮樣改變，基膜周圍蛋白質(zhì)沉著。在肺上皮細(xì)胞和肺毛細(xì)血管內(nèi)皮間可見電子透明無定形沉積物及纖維狀細(xì)絲。肺泡上皮與毛細(xì)血管間膠原原纖維增生處可見到大小不一的透亮區(qū)，呈類圓形或不規(guī)則型并與基膜混合在一起。 2、糖尿病大鼠造模成功后出現(xiàn)明顯的多飲、多食、多尿癥狀，體重明顯下降，活動(dòng)減弱，一般狀態(tài)差。殺檢時(shí)，糖尿病組體重低于對(duì)照組，血糖高于對(duì)照組，差異均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。糖尿病組肺組織

6、的免疫組化圖像分析結(jié)果表明，AGEs、sP-A的表達(dá)較對(duì)照組增強(qiáng)，隨著糖尿病病程的進(jìn)展，這些因子的表達(dá)也增強(qiáng)。糖尿病組比正常對(duì)照組表達(dá)增多，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論: 1、糖尿病可以導(dǎo)致肺損害，透射電鏡觀察可見糖尿病肺組織的超微結(jié)構(gòu)改變包括肺實(shí)質(zhì)和肺間質(zhì)。 2、尾靜脈一次注射鏈脲佐菌素(STZ)可以成功制備糖尿病大鼠模型。 3、糖尿病組大鼠肺組織AGEs較正常對(duì)照組增高，提示可能為高糖毒性引起非酶糖化等