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1、豆科植物的根際生態(tài)系統(tǒng)存在著大量的叢枝菌根(Arbuscular Mycorrhiza,AM)真菌和根瘤菌,它們?cè)陂L(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中形成了叢枝菌根真菌-豆科植物-根瘤菌共生體系。在共生體系中,土壤環(huán)境中的磷元素可被AM真菌的根外菌絲(Extraradical Mycelium,ERM)吸收,供應(yīng)豆科植物,促進(jìn)根瘤的形成和固氮作用,反之固氮作用為AM真菌生長(zhǎng)提供良好的氮素營(yíng)養(yǎng),提高AM真菌侵染率。AM真菌還可從外界環(huán)境中吸收不同形態(tài)的氮源,
2、同化后以精氨酸(Arginine,Arg)的形式在菌絲中運(yùn)轉(zhuǎn)和傳遞。本文以綠豆(Phaseolus radiatusL.,綠寶六號(hào))作為宿主植物接種AM真菌(Glomus intraradices)、根瘤菌(CCBAUA.25072)或雙接種(AM真菌和根瘤菌),采用三室隔離培養(yǎng)法,研究不同磷礦粉施用量、不同形式氮源、不同氮磷濃度組合及鎘脅迫對(duì)共生體系中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收及氮代謝精氨酸產(chǎn)量的影響。
(1)采用三室隔離培養(yǎng)法,向菌絲室
3、依次施加0 g/kg、0.06 g/kg、0.12 g/kg和0.24 g/kg的磷礦粉,研究不同磷礦粉施用量對(duì)共生體系吸磷量及氮代謝產(chǎn)精氨酸的影響。結(jié)果表明,雙接種的效果明顯高于單接AM真菌、根瘤菌處理,并在0.12 g/kg水平下植物總磷含量最多,綠豆根系的根瘤數(shù)量及根瘤鮮重最多,AM真菌菌根侵染率最高,精氨酸含量最多,但隨著磷礦粉濃度的增加,效果降低。
(2)根瘤菌能通過(guò)生物固氮作用吸收空氣中的氮,AM真菌則可利用ERM
4、從外界環(huán)境中吸收不同形態(tài)的氮。采用三室隔離培養(yǎng)法,向菌絲室分別施加4mmol/L NH4Cl,4 mmol/L NH4NO3,4 mmol/L尿素(Urea)和4 mmol/L精氨酸(Arginine,Arg)為氮源,研究綠豆接種AM真菌吸收外源氮產(chǎn)精氨酸的影響。結(jié)果表明,不同接種處理下不同外源氮對(duì)菌根中精氨酸含量影響不同,單接AM真菌及雙接種均在施加外源氮Arg和尿素時(shí)Arg含量比較高,且雙接種明顯高于單接AM真菌處理,而單接根瘤菌處
5、理中Arg含量變化不明顯。與單接種相比,雙接種下菌根侵染率、根瘤數(shù)、根瘤鮮重及莖葉中總氮含量都有所提高,且在施加NH4NO3時(shí)效果最好。
(3)不同的氮、磷濃度組合施加在三室培養(yǎng)盒的菌絲室,探究最有利于AM真菌-豆科植物-根瘤菌共生體系生長(zhǎng)發(fā)育及氮代謝產(chǎn)精氨酸的氮磷濃度。結(jié)果表明,雙接種的綠豆生物量、葉綠素含量、菌根侵染率、根瘤數(shù)、總磷總氮含量及Arg含量都顯著高于單接AM真菌、根瘤菌處理,且隨著氮濃度的升高而升高,磷濃度的升
6、高而降低,并在肥料處理為4 mmol/L尿素、0.01 mmol/L磷酸二氫鉀水平下生長(zhǎng)效果最好,但根瘤數(shù)及根瘤鮮重則隨著氮濃度的升高而降低,磷濃度的升高而升高,在肥料處理為0.4 mmol/L尿素、0.1 mmol/L磷酸二氫鉀時(shí)最好。
(4)采用三室隔離培養(yǎng)法研究鎘脅迫對(duì)AM真菌-豆科植物-根瘤菌共生體吸收同化外源氮產(chǎn)生精氨酸的影響,菌絲室施加的外源氮分別為NH4NO3、(NH4)2SO4和尿素,濃度為4 mmol/L。結(jié)
7、果表明,鎘脅迫嚴(yán)重影響了單接根瘤菌綠豆的生長(zhǎng),但施加外源氮在一定程度上緩解了單接AM真菌和雙接種綠豆的脅迫作用,并且相同氮源處理下,雙接種的效果更好。鎘脅迫下,雙接種綠豆在NH4NO3為外源氮時(shí)菌根侵染率最高,(NH4)2SO4時(shí)根瘤數(shù)及根瘤鮮重最多,尿素為氮源時(shí)Arg含量最多。SOD、POD、CAT三種酶也受到了鎘脅迫的影響,活性明顯提高,且氮源的施加提高了單接AM真菌和雙接種下的酶活性,但不同氮源對(duì)其影響不同,雙接種下酶的活性高于單
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