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文檔簡介
1、副豬嗜血桿菌(Haemophilus para suis,HPS)感染引發(fā)豬副豬嗜血桿菌病,高發(fā)病率和高死亡率使其成為全球范圍內(nèi)危害養(yǎng)豬業(yè)的主要病菌之一。截至目前為止,我們對(duì)其發(fā)病分子機(jī)制及宿主應(yīng)答機(jī)理認(rèn)識(shí)仍不夠清晰。本實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)感染HPS的豬脾臟進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,發(fā)現(xiàn)豬S100A8、S100A9和S100A12基因表達(dá)顯著上調(diào),用LPS及polyI∶C模擬細(xì)菌及病毒刺激均能有效引起上述基因的上調(diào)表達(dá),并且呈現(xiàn)相同的表達(dá)規(guī)律。為了揭示這
2、幾個(gè)基因的功能,本研究選取豬S100A12基因,對(duì)其轉(zhuǎn)錄調(diào)控及信號(hào)通路進(jìn)行功能研究。取得了以下結(jié)果:
1.運(yùn)用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)對(duì)豬S100A12的轉(zhuǎn)錄調(diào)控進(jìn)行研究,結(jié)果表明豬S100A12基因受轉(zhuǎn)錄因子Sox-5負(fù)調(diào)控。
2.RT-PCR方法檢測(cè)豬S100A8、S100A9、S100A12和RAGE基因在成年長白豬7個(gè)組織及兩個(gè)豬源細(xì)胞系的表達(dá)情況,結(jié)果表明豬S100A8、S100A9和S100A12基因在脾臟、肺
3、臟中高表達(dá),并且三者呈現(xiàn)一致的表達(dá)模式;豬RAGE基因僅在肺組織中高表達(dá)。
3.在PK-15細(xì)胞中S100A12不能通過RAGE信號(hào)通路激活NF-κB,但S100A12能通過TLR4信號(hào)通路激活NF-κB。
4.在C2C12細(xì)胞中S100A12可以與RAGE結(jié)合有效激活NF-κB,并且在一定范圍內(nèi)隨著S100A12轉(zhuǎn)染劑量的增加,NF-κB活性增加;S100A8/A9共轉(zhuǎn)染可以激活NF-κB活性,RAGE可以抑制S1
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