Mucin 16的生物學(xué)研究與應(yīng)用.pdf

1、Mucin16(簡稱MUC16)是一種跨膜蛋白，為Mucin家族成員之一。在卵巢癌和其他癌癥中，其胞外部分可以被剪切釋放到胞外基質(zhì)或血清中，因此成為癌癥診斷，尤其是卵巢癌診斷中的重要檢測指標(biāo)。胞外部分也稱為糖類抗原125(CA125)。MUC16在癌癥發(fā)生過程中的作用尚待進(jìn)一步探索。已有研究表明MUC16可能直接或間接參與腫瘤生長信號(hào)通路，進(jìn)而影響腫瘤的生長和遷移。本課題研究目的是制備出抗MUC16的單克隆抗體，作為日后研究MUC16生

2、物學(xué)功能的工具，同時(shí)建立雙抗體夾心ELISA檢測MUC16的方法。此外，本課題還對(duì)MUC16和其它蛋白的相互作用進(jìn)行了初步分析，以便進(jìn)一步研究MUC16的功能。
　　本實(shí)驗(yàn)室從卵巢癌細(xì)胞擴(kuò)增出MUC16基因的片段，將其連接到原核生物表達(dá)載體上，轉(zhuǎn)入大腸桿菌表達(dá)出MUC16片段的融合蛋白，以此為抗原進(jìn)行單克隆抗體制備，獲得一些特異性的抗MUC16的單克隆抗體。本課題對(duì)這些抗體進(jìn)行初步的配對(duì)實(shí)驗(yàn)，挑選出可配對(duì)的MUC16抗體，進(jìn)行建立

3、雙抗體夾心ELISA方法的探索，繪制檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線，并對(duì)該法的靈敏度、穩(wěn)定性和特異性進(jìn)行鑒定。為未來應(yīng)用于臨床檢測病人血清打下基礎(chǔ)。
　　MUC16已經(jīng)在臨床上用于癌癥進(jìn)展的監(jiān)測，但是其在癌癥發(fā)生過程中的功能尚不清楚，和其相互作用的蛋白知之甚少。因此，對(duì)MUC16的生物學(xué)功能探索也是本實(shí)驗(yàn)室的研究重點(diǎn)。本課題探討了MUC16和其它蛋白的相互作用，接下來希望通過相互作用的研究進(jìn)一步闡明MUC16的功能和定位。通過GSTPull-dow