Rg1對(duì)氧化損傷人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　觀察Rg1對(duì)過氧化損傷的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞形態(tài)、增殖、衰老、細(xì)胞因子分泌、胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達(dá)的影響，探討Rg1對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞有無保護(hù)作用，修復(fù)損傷的程度及可能的作用機(jī)制，以服務(wù)于干細(xì)胞治療，為恢復(fù)神經(jīng)損傷等相關(guān)病人的功能找尋途徑。
　　方法：
　　取P5至P6代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，加入不同濃度的Rg1，觀察其對(duì)細(xì)胞增殖的影響并篩選最適藥物濃度。細(xì)胞隨機(jī)分為6組:陰性對(duì)照組（以3.3×105個(gè)/ml細(xì)胞密度

2、接種到含50 n g/m L干細(xì)胞生長因子、10％胎牛血清、100U/ml青霉素、100U/ml鏈霉素的培養(yǎng)基），模型組（陰性對(duì)照組條件下培養(yǎng)，細(xì)胞融合達(dá)80％時(shí)加入1.6μM過氧化氫），Rg1由低至高3個(gè)劑量組（模型組條件下培養(yǎng)30分鐘后，加入Rg1各0.5μM、4μM、32μM，繼續(xù)培養(yǎng)36小時(shí)），陽性對(duì)照組（模型組條件下培養(yǎng)30分鐘后，加入220μM維生素C，繼續(xù)培養(yǎng)36小時(shí)）。觀察各組細(xì)胞的增殖、衰老，培養(yǎng)上清液中TNF-α、丙

3、二醛水平，干細(xì)胞中p-p38、p-JNK、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽表達(dá)的情況。
　　結(jié)果：
　　32μM人參皂苷Rg1組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖率最高。與模型組相比，隨著劑量增加，Rg1組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖增加，衰老均減少，TNF-α、 p-JNK、p-p38、丙二醛表達(dá)降低，過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽表達(dá)增強(qiáng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。陽性對(duì)照組上述指標(biāo)介于Rg1高、低劑量之間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、意義(P＜0.05)。與陰性對(duì)照組比較，模型組、人參皂苷Rg1組及陽性對(duì)照組人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖降低，衰老增多，TNF-α、 p-JNK、p-p38蛋白、丙二醛表達(dá)增加，過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽表達(dá)減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　32μM人參皂苷Rg1為促進(jìn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的最適濃度。Rg1可促進(jìn)氧化損傷的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖，延緩衰老，下調(diào)TNF-α、p-JNK蛋白、p-p3