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1、目的:肝臟是哺乳動(dòng)物體內(nèi)具有極強(qiáng)再生能力的器官。在肝再生中,細(xì)胞數(shù)目和細(xì)胞體積增加都需要蛋白質(zhì)和氨基酸,本論文用Affymetrix芯片檢測(cè)17個(gè)時(shí)間點(diǎn)再生肝中參與氨基酸合成及運(yùn)輸?shù)拿负偷鞍椎膍RNA含量變化,以了解與氨基酸合成有關(guān)的基因在肝再生中的作用,為研究肝再生的機(jī)理和治療肝病、開發(fā)藥物提供資料。 方法:用Affymetrix公司的Ratgenome2302.0array芯片檢測(cè)大部分肝切除(PH)后恢復(fù)0、0.5、1、2
2、、4、6、8、12、16、24、30、36、42、54、66、96和144h17個(gè)時(shí)間點(diǎn)的再生肝與氨基酸及其衍生物合成、運(yùn)輸、調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)動(dòng)態(tài)。用氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定了PH后上述17個(gè)時(shí)間點(diǎn)肝組織的總氨基酸及天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、脯氨酸和色氨酸的含量,依據(jù)凱式定氮法用自動(dòng)定氮儀測(cè)定樣品中總蛋白的含量。 結(jié)果:不同再
3、生肝的總蛋白含量、總氨基酸含量及18種氨基酸含量均不相同;與氨基酸及其衍生物合成、運(yùn)輸相關(guān)的60種基因在肝再生中發(fā)生了有意義變化,其中,21種上調(diào)表達(dá),21種下調(diào)表達(dá),18種上/下調(diào)表達(dá);0.5h有12種基因上調(diào)表達(dá),1h有6種基因上調(diào)表達(dá),2h或4h有7種基因上調(diào)表達(dá),6h或8h有6種基因上調(diào)表達(dá),16h-144h某種點(diǎn)上調(diào)的有8種基因;0.5h或1h下調(diào)表達(dá)的有6種基因,2h或4h下調(diào)表達(dá)的5種基因,6h或8h下調(diào)表達(dá)的有5種基因,
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