β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后雙酚A暴露的子鼠雄性生殖細胞中的表達.pdf

1、背景：
　　雙酚A（bisphenol A,BPA）是人們生活中經(jīng)常接觸到的一類酚類環(huán)境雌激素，通過干擾機體自身激素的合成和分泌等，產(chǎn)生相應(yīng)的生物學(xué)毒性作用。以往研究表明BPA對睪丸有毒性，是潛在的內(nèi)分泌干擾物。BPA影響機體機制具有多樣性，而Wnt/β-catenin信號通路是調(diào)節(jié)機體生長和發(fā)育的一個關(guān)鍵性的信號通路。Wnt/β-catenin信號通路在腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移、造血干細胞、神經(jīng)前體細胞和細胞增殖分化等領(lǐng)域研究較多，

2、而在BPA生殖毒性領(lǐng)域的研究還比較少。
　　目的：
　　本研究初步探討β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后雙酚A（BPA）暴露對子鼠雄性生殖表達及意義。
　　方法：
　　將受孕后的重量相當?shù)腎CR雌鼠隨機均分為4組，每組9只，即溶劑對照組、雙酚A低組（10nmol/L）、雙酚A中組（50 nmol/L）、雙酚A高組（300 nmol/L）。自PGD0起開始孕鼠染毒，哺乳期間繼續(xù)染毒，斷乳后雄性仔鼠繼續(xù)染毒

3、直至產(chǎn)后42d（PGD42）。仔鼠出生后統(tǒng)計每組小鼠的數(shù)量和雌雄比例，并于PGD42處死雄性ICR仔鼠，無菌取出雙側(cè)仔鼠睪丸稱重，部分4％多聚甲醛固定，用于H.E染色和免疫組化檢測蛋白β-catenin、DKK-1，剩余部分置液氮凍存?zhèn)錅y蛋白，用于Western bolt定量檢測β-catenin、DKK-1蛋白的表達。
　　結(jié)果：
　　實驗組每只母鼠所生的子鼠數(shù)量和雌雄比例與溶劑對照組相比無明顯差異（P>0.05）。BPA

4、組較溶劑對照組仔鼠睪丸臟器系數(shù)降低，且隨著染毒劑量的增加下降趨勢越明顯。H.E染色結(jié)果表明，在暴露BPA后，小鼠的睪丸組織發(fā)生了病理學(xué)變化，即睪丸生精小管中的生精細胞層數(shù)和細胞數(shù)量隨著染毒劑量的增加逐漸減少，細胞排列紊亂等。免疫組化顯示，β-catenin、DKK-1蛋白多位于睪丸的間質(zhì)細胞和精原細胞中，Western blot檢測結(jié)果顯示β-catenin、DKK-1蛋白表達也隨著染毒劑量的增加而明顯增加。
　　結(jié)論：