Numb與α-catenin蛋白在胃癌及其配對正常胃粘膜中的表達及意義.pdf

1、目的:
　　研究顯示Numb是參與腫瘤信號轉(zhuǎn)導途徑的重要成分，α-catenin的異常表達在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中具有重要意義。本研究檢測Numb及α-catenin在胃癌組織及配對正常胃粘膜中的表達，分析Numb和α-catenin在胃癌組織中表達的相關(guān)性，并分析兩者與胃癌臨床病理因素的關(guān)系以及兩者在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用及意義。
　　方法:
　　臨床病理資料及組織芯片制作:收集中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院外科手術(shù)切除胃癌組織

2、113例，其中107例為同時收集距癌灶邊緣大于5cm處正常胃黏膜作為對照以及腸上皮化生56例。常規(guī)組織蠟塊行4um組織切片，常規(guī)HE染色，用于目標組織的定位。免疫組化染色及判定方法:采用PV9000免疫組化二步法檢測胃癌及癌前病變中Numb和α-catenin的表達。兔抗人Numb多克隆抗體（克隆號:ab14140，工作濃度為1∶400）購自美國abeam公司和兔抗人Alpha Ecatenin多克隆抗體（工作濃度為1∶200）購自美國

3、proteintech公司，PV9000免疫組化檢測試劑盒和氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色試劑盒購自北京中杉生物有限公司。采用組織芯片制作儀構(gòu)建胃癌及癌前病變組織芯片蠟塊，行4μm連續(xù)切片。采用檸檬酸修復液(pH6.0)高溫高壓修復抗原，PBS替代一抗做陰性對照。結(jié)果判定方法:Numb蛋白陽性反應為棕黃色顆粒定位于細胞膜，α-catenin蛋白陽性反應為棕黃色顆粒主要在細胞膜，少數(shù)在細胞槳。每個病例由兩位觀察者采用盲法隨機選擇2個高倍視野，計

4、數(shù)200個細胞，染色強度(A)以陽性細胞呈色反應為準:無特異性著色為0分，淺棕色為1分，棕黃色為2分，深棕色為3分;染色的陽性細胞所占比例(B)按下列標準評定記分:陰性細胞或陽性細胞＜5％為0分，陽性細胞占5～25％為1分，陽性細胞占26％～50％為2分，陽性細胞51％～75％為3分，陽性細胞＞75％為4分。兩種評分相乘(A×B)，將結(jié)果分為:0分為陰性(-);1～4分為弱陽性(+);5～8分為中度陽性(++);9～12分為強陽性（++

5、+）。
　　結(jié)果:
　　Numb蛋白在胃癌組織中的陽性表達率(67/110，60.91％)顯著低于正常胃粘膜(97/97，100％)、腸上皮化生(55/56，98.21％)的陽性表達率，P＜0.05;Numb在腸上皮化生與正常胃粘膜的陽性表達比較未見統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。Numb蛋白的陽性表達率在Lauren分型腸型胃癌組(80.77％，42/52)顯著高于彌漫型胃癌組(43.10％，25/58)，P＜0.0001。高

6、中分化組Numb蛋白的陽性表達率(42/51，82.35％)高于低分化組(20/48，41.67％)的陽性表達率(P＜0.05)。Numb的表達與患者的年齡、性別、Borrmann分型、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期無關(guān)，P＞0.05。
　　α-catenin蛋白在胃癌組織中的陽性表達率(86/113，76.11％)顯著低于正常胃粘膜(107/107，100％)、腸上皮化生(47/47，100％)的陽性表達率，P＜0.05;α-

7、catenin在腸上皮化生與正常胃粘膜的陽性表達比較未見統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。BorrmannⅠ+Ⅱ型(10/13，84.62％)和BorrmannⅢ型(73/93，78.49％)胃癌中α-catenin蛋白的陽性表達率顯著高于BorrmannⅣ(2/7，28.57％)中的表達(P＜0.05)。α-catenin蛋白陽性表達率在腸型胃癌組(90.74％，49/54)顯著高于彌漫型胃癌組(62.71％，37/59)，P＜0.005)

8、。高中分化胃癌組α-catenin蛋白的陽性表達率(48/53，90.57％)高于低分化組(33/50，66％)，P＜0.05。但是，α-catenin在細胞膜中的表達與患者的年齡、性別、浸潤深度、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移及TNM分期無關(guān)，P＞0.05。
　　109例胃癌組織中Numb的表達與α-catenin表達呈正相關(guān)，(rk=0.184，P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　與正常胃粘膜相比，在胃癌組織中存在著Numb蛋白表達

9、和α-catenin蛋白表達的下調(diào)，且在胃癌組織中分化程度越低，兩者表達越低。胃癌中Numb蛋白的表達與胃癌的Lauren分型相關(guān)，α-catenin蛋白的表達與胃癌的Borrmann分型及Lauren分型相關(guān)。Numb和α-catenin可作為細胞分化程度的標志，在分化程度低的胃癌組織中兩者表達顯著下調(diào)，提示兩者可能通過某些通路參與調(diào)控胃癌的組織學分化;胃癌組織中Numb蛋白表達與α-catenin表達呈正相關(guān)，提示Numb蛋白可能通