紅褐色烏蘇里貉TYRP1基因的克隆及表達水平研究.pdf

1、a n dE x p r e s s i o n L e v e l f o rR e d d i s h - 一b r o w nW u s u l i R a c c o o n D o gT h e s i s l | u b m i t t e dt 0 1l a e S l SS U b m l t t e t oQ i n g d a o A g n ' c u l t u m l U n i v e r s i t

2、 yI nF u l f i l l m e n to f t h e R e q u i r e m e n tf o r t h e D e g r e e o fM a s t e r o f A g r o n o m yZ h u Y A n f e i( C o l l e g e o f A n i m a l S c i e n c ea n d T e c h n o l o g y )S u p e r v i s

3、o r ：Z h a n g T i n g r o n gS u n J i n h a iQ i n g d a o ’C h i n aJ u n e ，2 0 1 4青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文 摘要紅褐色烏蘇里貉丁駱p J 基因的克隆及表達水平研究摘要為了探討突變紅褐色烏蘇里貉和野生型烏蘇里貉丁y R 尸』基因的核酸序列以及丁豫J P J 基因在兩種毛色貉中的表達水平，本試驗以青島萊西萬盛農(nóng)業(yè)有限公司的野生型烏蘇里貉和紅褐色烏蘇里

4、貉為研究對象，利用克隆測序技術(shù)，成功克隆了兩種毛色貉T Y R P l 基因的C D S 序列，進行了序列對比分析，并與其他物種的同源性進行了比較。利用實時熒光定量P C R 技術(shù)研究了n 碾P ，基因在野生型烏蘇里貉與突變紅褐色烏蘇里貉中的m R N A 表達水平差異。以期為z y 胛- 基因的功能分析及紅褐色烏蘇里貉毛色突變分子遺傳機制的研究提供一定的理論基礎(chǔ)。本試驗成功克隆得到野生型烏蘇里貉和紅褐色鳥蘇里貉腳J 基因全長C D S

5、 序列，利用D N A 凇N 軟件進行對比分析，結(jié)果顯示兩種毛色貉序列完全匹配，全長均為1 6 1 4 b p ，包括完整的開放閱讀框，共編碼5 3 7 個氨基酸。與其他物種進行同源性比較分析，結(jié)果顯示紅褐色烏蘇里貉T Y R P _ ，基因編碼序列與狗、豬、綿羊、小鼠、人、牛、貓、馬、虎鯨和黑猩猩核酸序列高度同源，同源性分別為9 9 ．0 7 ％、9 0 ．5 6 ％、8 9 ．6 4 ％、8 3 ．2 2 ％、8 8 ．9 0 ％、

6、8 9 ．3 9 ％、9 0 ．8 7 ％、8 8 ．6 3 ％、9 0 ．2 5 ％和8 8 ．6 5 ％，表現(xiàn)出了高度的保守性。對熒光定量數(shù)據(jù)結(jié)果進行分析，利用S P S S 軟件進行獨立樣本T 檢驗，結(jié)果表明n 聹J 基因在兩種毛色的貉皮膚組織中均可穩(wěn)定表達，利用F = ( 1 + E ) 叱△c t 計算可知腳J 基因在紅褐色烏蘇里貉中的表達量是野生型烏蘇里貉的O ．9 3 倍，但差異不顯著( P > 0 ．0 5 ) 。