低分子量肝素鈣口服制劑的制備及其生物利用度的測定.pdf

1、低分子量肝素鈣（Low molecular weight heparin calcium，LMWH-Ca）是由肝素在酸性條件下裂解而來的，它具有較高的抗Xa因子活性（AFXa）和較低的抗Ⅱa因子活性（AFⅡa），其AFⅩa/AFⅡa一般在4：1到2：1之間。故相比較而言，它的抗血栓作用優(yōu)于肝素，而抗凝血作用低于肝素，且具有皮下注射吸收良好、生物利用度高、體內(nèi)半衰期長和出血傾向小等優(yōu)點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于臨床。但由于LMWH-Ca為處方藥，

2、僅限于住院病人的使用，這就限制了它的用藥范圍。 為了擴(kuò)大LMWH-Ca的臨床使用范圍，本論文研究的LMWH-Ca口服制劑，主要針對非住院病人的預(yù)防和鞏固治療。由于LMWH-Ca具有較大的分子量并帶極強(qiáng)的負(fù)電荷，口服吸收一直是個(gè)難題。本論文研制了三種不同LMWH-Ca口服制劑的處方，并用均勻設(shè)計(jì)法篩選出每種LMWH-Ca口服制劑的優(yōu)化處方工藝，然后經(jīng)過大鼠口服生物利用度實(shí)驗(yàn)，最終篩選出一種相對較理想的制劑處方。 本論文對L

3、MWH-Ca口服制劑的處方篩選、體內(nèi)外抗Xa效價(jià)測定、大鼠口服的生物利用度等進(jìn)行了系統(tǒng)研究，主要有以下幾個(gè)方面。 1、LMWH-Ca的三種不同口服制劑的處方篩選 應(yīng)用現(xiàn)代制劑方法，制成了三種不同的LMWH-Ca口服制劑，即：以聚乙二醇6000為囊材，將LMWH-Ca制備成口服微囊制劑；用β-環(huán)糊精將LMWH-Ca制備成口服包合物制劑；用一種新型的促胃腸道黏膜吸收劑：N-[10-（2-羥基苯甲酰基）氨基]癸酸鈉（Sodiu

4、m N-[10-（2-hydroxybenzoyl）amino]decanoate，SNAD）將LMWH-Ca制備成新型的口服制劑。運(yùn)用均勻?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)法對上述三種處方的不同制備工藝進(jìn)行優(yōu)化篩選，得到優(yōu)化的處方工藝，再進(jìn)一步進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)篩選。 2、LMWH-Ca體內(nèi)外效價(jià)測定方法的建立 建立了生色底物法測定三種LMWH-Ca口服制劑的體外抗Xa效價(jià)的方法，便于準(zhǔn)確給藥。分別對三種LMWH-Ca口服制劑體外抗Xa效價(jià)測定方法進(jìn)

5、行了線性關(guān)系、精密度和穩(wěn)定性等方法學(xué)驗(yàn)證，試驗(yàn)結(jié)果顯示此方法線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r為0.99；精密度RSD為0.26％；穩(wěn)定性考察RSD為0.44％。 建立了生色底物法測定SD大鼠血漿中LMWH-Ca抗Xa效價(jià)的方法，在此基礎(chǔ)上可以獲得可靠的生物利用度結(jié)果。分別對體內(nèi)抗Xa效價(jià)測定方法進(jìn)行了線性關(guān)系、精密度和穩(wěn)定性等方法學(xué)驗(yàn)證。試驗(yàn)結(jié)果顯示，用生色底物法測定SD大鼠血漿中抗Xa效價(jià)的線性較好，相關(guān)系數(shù)為0.98；精密度RSD為

6、0.28％；穩(wěn)定性考察RSD為0.48％。 3、大鼠口服給藥的生物利用度研究 大鼠口服給藥后，用生色底物法測定三種LMWH-Ca口服制劑的相對生物利用度。SD大鼠采用口腔灌注方式給予三種優(yōu)選的LMWH-Ca口服制劑，給藥劑量按照口服制劑抗Xa效價(jià)和SD大鼠的體重進(jìn)行。在規(guī)定的時(shí)間，從SD大鼠的心臟取血，迅速離心，分離出血漿，用建立的體內(nèi)效價(jià)測定方法，測定每種LMWH-Ca口服制劑在不同時(shí)間點(diǎn)LMWH-Ca的血藥濃度，繪制

7、成曲線，與皮下注射給藥對照組進(jìn)行比較，即可計(jì)算出每種口服制劑的相對生物利用度。測得三種LMWH-Ca口服制劑的相對生物利用度分別約為4.9％，2.6％和19％。 經(jīng)過三種LMWH-Ca口服制劑的相對生物利用度的比較，可知加入SNAD的口服制劑處方，經(jīng)SD大鼠口服給藥的相對生物利用度最高；而用聚乙二醇6000制備LMWH-Ca口服微囊制劑和用β-環(huán)糊精將LMWH-Ca制備口服包合物制劑，相對生物利用度非常低，幾乎沒有吸收。