Myostatin、MyoD、Myogenin基因?qū)鹑A豬和長(zhǎng)白豬肉質(zhì)影響的比較研究.pdf

1、本課題采用半定量RT-PCR法，檢測(cè)了不同生長(zhǎng)階段金華豬和長(zhǎng)白豬（35d、80d、125d）背最長(zhǎng)肌中肌肉生長(zhǎng)抑制素（Myostatin、MSTN）、生肌調(diào)節(jié)因子（MyoD）和肌肉成肌素（Myogenin、MyoG）的mRNA水平，探討了他們的基因表達(dá)隨動(dòng)物體重增加的變化規(guī)律，以及在肌肉沉積過(guò)程中的調(diào)控作用。
　　根據(jù)Genebank登陸的MSTN、MyoD、MyoG和內(nèi)標(biāo)β-actin基因序列設(shè)計(jì)引物，分別以背最長(zhǎng)肌組織RNA為

2、模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄和PCR，克隆得到的相應(yīng)基因片段（登錄號(hào)分別為NM_214435、SSU12574和NM_001012406）同源性分別為97.0％、97.8%和93.6%。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步探討了PCR體系中適宜的退火溫度、MgCl2濃度和循環(huán)次數(shù)，構(gòu)建了適合于相應(yīng)基因序列的優(yōu)化半定量RT-PCR法，用于不同生長(zhǎng)階段金華豬和長(zhǎng)白豬背最長(zhǎng)肌組織MSTN、MyoD和MyoG基因mRNA水平的測(cè)定。
　　試驗(yàn)所用的金華豬和長(zhǎng)白豬由浙江省

3、東陽(yáng)市金華豬保種場(chǎng)提供，按照品種分兩個(gè)組，每組18頭（28日齡斷奶）預(yù)試期7天，正試期90天，金華與長(zhǎng)白豬在相同的條件下飼養(yǎng)。分別于35,80和125日齡時(shí)采集背最長(zhǎng)肌樣品，測(cè)定瘦肉率，探討MSTN、MyoD和MyoG基因表達(dá)與肌肉沉積的關(guān)系。
　　試驗(yàn)結(jié)果表明，豬背最長(zhǎng)肌組織中MSTN、MyoD和MyoG基因表達(dá)均呈現(xiàn)一定的生物學(xué)發(fā)育規(guī)律：
　?、旁趦煞N豬的不同生長(zhǎng)階段（35日齡，80日齡，125日齡）MSTN mRNA都

4、被檢測(cè)到，其表達(dá)量在出生后35日齡時(shí)水平較高，而后，隨著年齡體重的增加而顯著減少(P<0.05)。但是，在整個(gè)試驗(yàn)期間，品種間無(wú)顯著差異(P<0.05)。
　?、圃趦煞N豬的不同生長(zhǎng)階段（35日齡，80日齡，125日齡）MyoD mRNA都被檢測(cè)到，MyoD基因在金華豬背最長(zhǎng)肌中的表達(dá)量隨著年齡體重的增加而增加，80日齡到125日齡階段增加平緩。而MyoD基因在長(zhǎng)白豬背最長(zhǎng)肌中的表達(dá)量則與金華豬的恰恰相反，長(zhǎng)白豬在出生后35日齡時(shí)水

5、平較高，而后，隨著年齡體重的增加而減少(P<0.05)。在整個(gè)試驗(yàn)期間，品種間差異顯著(P<0.05)。35日齡時(shí)品種間差異極顯著(P<0.01)。
　　⑶在兩種豬的不同生長(zhǎng)階段（35日齡，80日齡，125日齡）MyoG mRNA都被檢測(cè)到，金華豬背最長(zhǎng)肌中MyoG基因的表達(dá)35日齡時(shí)較低，而后隨著年齡和體重的增加而增加，但不同年齡階段MyoG基因表達(dá)差異不顯著。長(zhǎng)白豬背最長(zhǎng)肌中基因的表達(dá)則與金華豬相反，35日齡時(shí)較高，而后隨著年

6、齡和體重的增加而減少；同樣，不同年齡階段MyoG基因表達(dá)差異不顯著。但是，在整個(gè)試驗(yàn)期間，35日齡品種間差異顯著（P<0.05）。
　　本試驗(yàn)探討了MSTN、MyoD和MyoG基因與肌肉沉積的關(guān)系，結(jié)果表明，MSTN基因表達(dá)水平與胴體瘦肉率呈反比；MyoD基因表達(dá)水平在金華豬背最長(zhǎng)肌中隨著年齡和胴體瘦肉率的增加而增加呈正比變化，而長(zhǎng)白豬背最長(zhǎng)肌中的表達(dá)恰好相反；MyoG基因變化規(guī)律與MyoD基因變化規(guī)律相似。從而MSTN、MyoD