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1、目的:通過對(duì)壯藥山風(fēng)的抗炎、止血、鎮(zhèn)痛的藥理活性部位的篩選,確定其活性部位的相關(guān)藥理作用,為進(jìn)一步對(duì)其活性部位的化學(xué)成分的分離純化奠定了基礎(chǔ),為研制新型的藥物牙膏提供參考,同時(shí)也擴(kuò)大了壯藥的應(yīng)用范圍和加快了其產(chǎn)業(yè)化的速度。
方法:用乙醇提取、濃縮,分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取得山風(fēng)提取物不同極性部位。再分別通過對(duì)小鼠出血和凝血時(shí)間的影響來篩選止血有效部位;通過小鼠耳廓腫脹實(shí)驗(yàn)和大鼠足趾腫脹實(shí)驗(yàn)來篩選抗炎有效部位;
2、通過醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)和熱板法所致鎮(zhèn)痛反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)來篩選鎮(zhèn)痛有效部位。將壯藥山風(fēng)和山芝麻的有效部位及其復(fù)配物添加到牙膏基質(zhì)中,作為受試樣品,以牙膏基質(zhì)作為空白對(duì)照組,通過機(jī)械損傷致小鼠肝臟出血模型分別進(jìn)行止血測(cè)定,通過二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型進(jìn)行抗炎測(cè)定,通過醋酸引起小鼠扭體反應(yīng)模型進(jìn)行鎮(zhèn)痛測(cè)定。
山風(fēng)石油醚部位化學(xué)成分的分離:在制備薄層板上經(jīng)石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯(10∶1.5∶1)系統(tǒng)進(jìn)行二次分離后,在紫外下
3、把含量較高的一條亮綠色的硅膠色帶(其Rf值為0.51)刮下,并用相同的方法對(duì)此色帶進(jìn)行富集,把富集的硅膠用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯的混和溶劑進(jìn)行超聲溶解,減壓回收溶劑并將解吸混合物進(jìn)行柱層析分離。
結(jié)果:山風(fēng)正丁醇部位和乙酸乙酯部位均能縮短小鼠出血時(shí)間和小鼠凝血時(shí)間,具有止血作用;山風(fēng)石油醚部位和水部位均能抑制大鼠的足趾腫脹程度具有抗炎作用,而水部位還具有抑制小鼠耳廓的腫脹程度;山風(fēng)四個(gè)部位均可降低醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)
4、次數(shù),具有鎮(zhèn)痛作用,正丁醇部位還可以延長(zhǎng)小鼠舔后足時(shí)間;山芝麻正丁醇部位組、山芝麻正丁醇部位與山風(fēng)正丁醇部位混合組在對(duì)抗二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹明顯抑制作用;而山風(fēng)正丁醇組對(duì)抗二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹無(wú)明顯抑制作用。山芝麻正丁醇部位組、山芝麻正丁醇部位與山風(fēng)正丁醇部位混合組對(duì)醋酸引起的小鼠疼痛有明顯的緩解作用和明顯縮短機(jī)械損傷致小鼠肝臟出血時(shí)間;藥1-7組在對(duì)抗二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹均具有明顯抑制作用,均能明顯縮短機(jī)械損傷致小鼠肝臟出
5、血時(shí)間,且均對(duì)醋酸引起的小鼠疼痛有明顯的緩解作用。藥3、4在對(duì)抗二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹、機(jī)械損傷致小鼠肝臟出血時(shí)間方面與云南白藥牙膏作用相當(dāng),其中均以3組作用最為明顯。藥1-7組在對(duì)醋酸引起的小鼠疼痛作用的緩解方面與云南白藥牙膏作用相當(dāng),其中以7組作用最為明顯,表明山風(fēng)和山芝麻兩者一起混合配比使用具有一定的協(xié)同作用。
亮綠色的色帶上的解吸物質(zhì)經(jīng)柱層析分離后分別在石油醚-乙酸乙酯(55∶1),(30∶1),(25∶1)洗脫
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