先天性膽總管囊腫腸神經(jīng)分布及發(fā)病機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過(guò)檢測(cè)對(duì)比先天性膽總管囊腫（Congenital choledochal cyst，CCC）不同部位囊壁組織與計(jì)劃外懷孕中晚期終止妊娠胎兒膽管壁組織的神經(jīng)生長(zhǎng)因子（Nervous growth factor，NGF）及其受體（高親和力受體TrkA和低親和力受體P75NGFR）表達(dá)、神經(jīng)細(xì)胞特異性烯醇化酶（Neurocyte specifice enolase，NSE）與蛋白基因產(chǎn)物S-100（Soluble protein100

2、，S-100）的表達(dá)，從膽管壁腸神經(jīng)的發(fā)育與分布角度探討其在CCC發(fā)病機(jī)制中的作用，豐富和完善CCC的發(fā)病機(jī)理；同時(shí)NSE與S-100的測(cè)定具有協(xié)同互補(bǔ)作用，可作為判斷膽道神經(jīng)發(fā)育狀況的良好標(biāo)記物。
　　 方法：隨機(jī)選取2007年1月～2009年1月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院小兒外科收治的先天性膽總管囊腫患兒22例作為研究對(duì)象，男4例，女18例；年齡4.44±3.90歲（1個(gè)月～18歲）。其中以腹痛就診者14例，以黃染白便就診者6例，

3、以發(fā)熱嘔吐就診者1例，B超常規(guī)普查時(shí)發(fā)現(xiàn)1例。所有患兒術(shù)前均經(jīng)B超或CT明確診斷，手術(shù)切除膽總管囊腫和膽囊，行肝門空腸Roux-Y吻合術(shù)，分別切取膽總管囊腫遠(yuǎn)端、近端的囊壁和膽囊壁作為實(shí)驗(yàn)組。選取計(jì)劃外懷孕中晚期終止妊娠的胎兒11例，其中男5例，女6例，孕齡7.36±0.81月（6～8個(gè)月）。切取胎兒的膽囊壁和膽總管壁作為對(duì)照組。將兩組所得標(biāo)本分別以10％多聚甲醛固定、石蠟包埋，采用S-P法作石蠟切片免疫組化染色。ABC顯色，細(xì)胞質(zhì)中呈

4、現(xiàn)棕黃色者為陽(yáng)性，藍(lán)色者為陰性，采用光學(xué)顯微鏡觀察結(jié)果。多功能真彩色細(xì)胞圖像分析管理系統(tǒng)分析處理，將陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)的表達(dá)按照0～1％=0、2～10％=1、11～50％=2、51～80％=3、81～100％=4分為五級(jí)（A）；陽(yáng)性細(xì)胞顯色強(qiáng)度按照0（陰性）、1（弱陽(yáng)性）、2（陽(yáng)性）、3（強(qiáng)陽(yáng)性）分為四級(jí)（B）。計(jì)算每五個(gè)視野下的陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)（IHS=AxB）。對(duì)比分析CCC患兒膽囊、膽總管囊壁不同部位和胎兒的膽囊和膽管壁之間的腸神經(jīng)發(fā)育各指標(biāo)

5、的表達(dá)情況。所得數(shù)據(jù)輸入SPSS13.0 for Windows軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用單因素的方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
　　 結(jié)果：光鏡下觀察NGF及其受體（TrkA和p75SGFR）、NSE和S-100的分布情況，發(fā)現(xiàn)所有上述指標(biāo)在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的標(biāo)本中均在胞質(zhì)中有不同程度的表達(dá)。其中NGF、TrkA、p75NOFR和NSE在先天性膽總管囊腫遠(yuǎn)端的表達(dá)分別為0.73±0.15，0.82±0.13，0.91±0.13和0.73±

6、0.12；在囊腫近端表達(dá)分別為1.50±0.18，2.14±0.34，1.50±0.25和1.50±0.25；在胎兒膽總管的表達(dá)分別為2.64±0.49，3.82±0.50.2.27±0.52和2.36±0.56?？梢钥闯錾鲜鲆蜃釉谙忍煨阅懣偣苣夷[遠(yuǎn)端的表達(dá)弱于在囊腫近端的表達(dá)（P<0.05），有顯著性差異。而在先天性膽總管囊腫的遠(yuǎn)端、近端的表達(dá)又均弱于在胎兒期膽總管的表達(dá)，三者之間有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；S-100在先天性膽

7、總管囊腫的遠(yuǎn)端、近端和胎兒期膽總管表達(dá)分別為1.00±0.11，1.59±0.20和2.73±0.38。S-100在先天性膽總管囊腫的遠(yuǎn)端、近端的表達(dá)也均弱于在胎兒期膽總管的表達(dá)（P<0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但是在先天性膽總管囊腫遠(yuǎn)端和近端的表達(dá)沒(méi)有差別（P>0.05），無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。上述指標(biāo)在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組膽囊標(biāo)本的表達(dá)無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.依據(jù)NGF、TrkA、p75NGFR在

8、CCC的遠(yuǎn)端及近端表達(dá)均弱于在胎兒膽總管的表達(dá)，認(rèn)為神經(jīng)生長(zhǎng)因子及其受體在CCC的發(fā)病中起到重要作用，腸神經(jīng)發(fā)育不良可能是其發(fā)病的重要原因之一。
　　 2.NGF、TrkA、p75NGFR在CCC遠(yuǎn)端的表達(dá)弱于囊腫近端的表達(dá)，說(shuō)明囊腫遠(yuǎn)端是病變之所在，上述指標(biāo)在囊腫遠(yuǎn)端的發(fā)育受限，進(jìn)一步導(dǎo)致膽總管的擴(kuò)張。
　　 3.NGF、TrkA、p75NGFR在CCC近端的表達(dá)弱于在胎兒膽總管的表達(dá)，推測(cè)可能是由于膽總管的擴(kuò)張，導(dǎo)致