硫化氫抑制高糖誘導的內皮細胞損傷的研究.pdf

1、[研究背景]
　　 近年來，被稱為繼心血管疾病和腫瘤性疾病之后“第三大非傳染性疾病”的糖尿病，已成為嚴重威脅人類健康、給社會帶來沉重負擔的世界性公共衛(wèi)生問題。作為嚴重危害人類健康的慢性疾病，糖尿病血管并發(fā)癥是糖尿病患者致殘與致死的主要原因，大血管病變直接影響糖尿病患者的預后與生存。動脈粥樣硬化(arteriosclerosis，AS)是大血管病變的病理基礎，研究發(fā)現血管內皮功能紊亂是AS病理變化的早期表現之一，也是AS產生的重要

2、初始階段。近年的研究發(fā)現曾被人們認為有毒、具有“臭雞蛋”氣味的硫化氫(hydrogensulfide，H2S)是繼一氧化氮(nitrogenoxide，NO)和一氧化碳(carbonmonoxide，CO)的第三種氣體信號分子。實驗證實，H2S發(fā)揮著廣泛的生物學效應，在多個系統、多種疾病的發(fā)生中均有重要的生理作用和病理生理意義。
　　 [目的]
　　 本實驗以高濃度葡萄糖下人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)為模型，通過對細

3、胞凋亡率、細胞凋亡相關蛋白及H2S生成量的觀察，研究硫化氫對高糖誘導的內皮細胞損傷的影響，并初步探討其機制。
　　 [方法]
　　 將購自ATCC的HUVECs接種于含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中，置于37℃、5％CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。待細胞密度達到70％～80％時，將HUVECs分為4組:A組為正常糖濃度組(5.5mmol/L)，B組為高糖組(25mmol/L)，C組為高糖(25mmol/L)+硫氫化鈉(50μ

4、mol/L)組，D組為正常糖濃度（5.5mmol/L）+硫氫化鈉(50μmol/L)組，處理48h后，測定細胞內H2S的含量，MTT檢測細胞存活率，WesternBlot檢測細胞凋亡相關蛋白Bax、Bcl-2和Cleavedcaspase-3的表達。
　　 [結果]
　　 ①與A組相比，B組H2S生成量明顯減少(P＜0.05)，與B組相比，C組H2S生成量明顯增多(P＜0.05)。
　　 ②與A組相比，B組的細胞

5、存活率明顯減少(P＜0.05)，而C的細胞存活率較B組顯著升高（P＜0.05）。
　　 ③與A組相比，B組Bax表達顯著升高(P＜0.05)，Bcl-2的表達顯著降低(P＜0.05)而Caspase-3活性明顯增強(P＜0.05);與B組相比，C組Bax水平顯著降低(P＜0.05)，Bcl-2水平顯著升高(P＜0.05)，Caspase-3活性顯著下降(P＜0.05)。與A組相比，D組各指標表達差異無統計學意義(P＜0.05)。