高表達(dá)mM-CSF的血液腫瘤細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞功能性極化的作用.pdf

1、碩士學(xué)位論文高表達(dá)mMCSF的血液腫瘤細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞功能性極化的作用所在院所：血液學(xué)研究所研究生姓名：指導(dǎo)教師：導(dǎo)師小組：學(xué)科專(zhuān)業(yè)：完成日期：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文高表達(dá)mMCSF的血液腫瘤細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞功能性極化的作用摘要巨噬細(xì)胞是免疫系統(tǒng)中重要的效應(yīng)細(xì)胞，其表型和功能具有極強(qiáng)的可塑性。不同的微環(huán)境下，巨噬細(xì)胞可發(fā)生表型及功能極化從而呈現(xiàn)出不同的功能。腫瘤組織中巨噬細(xì)胞的功能具有兩面性，是腫瘤發(fā)展過(guò)程中的一把“

2、雙刃劍”。巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)是一個(gè)多功能的細(xì)胞因子，其異常表達(dá)和功能與多種疾病的發(fā)生和進(jìn)程密切相關(guān)。膜結(jié)合MCSF(nl】ⅥCSF)是它的一種選擇性剪接產(chǎn)物，在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中可檢出其高表達(dá)，具有粘附分子樣作用，可以通過(guò)并置性作用機(jī)制部分代替MCSF的功能?；诮孝鲆籆SF高表達(dá)常發(fā)生于造血系統(tǒng)惡性腫瘤中，提示它在這些惡性疾病中具有重要的生物學(xué)意義。本論文是在我室前期研究的基礎(chǔ)上，對(duì)高表達(dá)InMCSF的血液腫瘤細(xì)胞對(duì)巨噬

3、細(xì)胞功能性極化的影響進(jìn)行了初步探索。采用裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)，將高表達(dá)mMCSF的血液腫瘤細(xì)胞接種裸鼠。免疫熒光法觀察瘤組織中巨噬細(xì)胞的分布及表型特征。發(fā)現(xiàn)瘤組織中有大量的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，且巨噬細(xì)胞表達(dá)選擇性活化巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記CD206。采用流式細(xì)胞術(shù)分選瘤組織中的巨噬細(xì)胞，對(duì)其表型和功能進(jìn)行進(jìn)一步探索。雖然能獲得一定數(shù)量的巨噬細(xì)胞，但巨噬細(xì)胞易貼壁，回收率不高。故選取小鼠單核巨噬細(xì)胞系RAW2647與高表達(dá)n吐訂CSF的血液腫瘤細(xì)胞體外共

4、培養(yǎng)，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)共培養(yǎng)巨噬細(xì)胞表面分子CD206(選擇性活化巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記)和細(xì)胞因子IL10，IL12，IL6，n師Q的蛋白水平表達(dá)情況。實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)高表達(dá)I洲CSF的血液腫瘤細(xì)胞對(duì)巨噬細(xì)胞基因表達(dá)的影響。吞噬實(shí)驗(yàn)檢測(cè)巨噬細(xì)胞功能的變化。結(jié)果顯示，高表達(dá)mMCSF的血液腫瘤細(xì)胞顯著上調(diào)巨噬細(xì)胞表面選擇性活化巨噬細(xì)胞表面標(biāo)記CD206的表達(dá)強(qiáng)度；上調(diào)細(xì)胞因子IL一10，n師a的表達(dá)水平，下調(diào)IL—12，IL6的表達(dá)水平；基因