苦碟子對橫紋肌溶解大鼠急性腎功能衰竭的腎臟保護作用.pdf

1、目的：觀察苦碟子對橫紋肌溶解引起的急性腎功能衰竭(ARF)大鼠腎臟的保護作用。
　　 方法：(1)采用肌注甘油法復(fù)制橫紋肌溶解引起的急性腎功能衰竭模型。200±20g的SD大鼠78只，禁水24小時后，隨機分為正常對照組、ARF組、苦碟子干預(yù)組，其中正常對照組6只、ARF組36只、苦碟子干預(yù)組36只；ARF組、苦碟子干預(yù)組又根據(jù)甘油注射后時間分為甘油注射后6h，1d，4d，7d，10d，14d等6個觀察亞組，每個亞組6只大鼠。正常

2、對照組兩后腿股內(nèi)側(cè)肌肉注射10ml/kg生理鹽水，ARF組50％甘油生理鹽水10ml/kg兩后腿股內(nèi)側(cè)肌肉單次注射，苦碟子干預(yù)組50％甘油生理鹽水肌肉注射前15分鐘腹腔注射苦碟子注射液20ml/kg。(2)應(yīng)用生化自動分析儀測各組大鼠腔靜脈血肌酐、尿素氮及肌酸激酶。(3)使用4％多聚甲醛緩沖液固定腎組織，腎組織常規(guī)制備石蠟切片行HE染色，觀察腎組織病理變化。(4)應(yīng)用急性腎小管壞死(ATN)評分法對腎小管損傷程度進行評分。(5)采用免疫

3、組織化學(xué)方法(SP法)檢測各組大鼠腎組織Bcl-2和Bax的表達變化。
　　 結(jié)果：(1)第6小時ARF組肌酐水平為74.44±7.03umol/L，尿素氮為12.19±2.60mmol/L，肌酸激酶586.09±61.75U/L，ATN評分為1.65±0.58，免疫組化Bcl-2表達22.54±2.04％，Bax表達22.65±2.64％；苦碟子干預(yù)組肌酐水平為66.80±4.11umol/L，尿素氮為9.24±1.76mmo

4、l/L，肌酸激酶440.37±48.33U/L，ATN評分為1.16±0.41，免疫組化Bcl-2表達27.59±3.43％，Bax表達18.12±2.63％，它們與正常對照組(分別為52.88±1.99umol/L，6.12±0.86mmol/L，179.82±15.06U/L，0.00±0.00，31.27±3.78％，13.37±2.41％)比較均有顯著性差異(P<0.05)。ARF組Bcl-2表達與ATN評分呈負相關(guān)(r=-0.

5、838，P<0.05)；Bax表達與ATN評分呈正相關(guān)(r=0.813，P<0.05)。與ARF組相比，苦碟子干預(yù)組肌酐、尿素氮、肌酸激酶、ATN評分、Bax表達均顯著減小(P<0.05)，免疫組化Bcl-2表達增強(P<0.05)。
　　 (2)第1天ARF組肌酐水平為280.26±19.04umol/L，尿素氮為24.28±7.11mmol/L，肌酸激酶816.17±110.34U/L，ATN評分為3.44±0.56，免疫組

6、化Bcl-2表達19.39±2.93％，Bax表達36.34±4.01％；苦碟子干預(yù)組肌酐水平為209.30±10.61umol/L，尿素氮為16.84±3.83mmol/L，肌酸激酶659.52±75.15U/L，ATN評分為3.17±0.36，免疫組化Bcl-2表達33.87±3.55％，Bax表達30.52±3.31％；它們與正常對照組(分別為52.88±1.99umol/L，6.12±0.86mmol/L，179.82±15.0

7、6U/L，0.00±0.00，31.27±3.78％，13.37±2.41％)比較均有顯著性差異(P<0.05)。ARF組Bcl-2表達與ATN評分呈負相關(guān)(r=-0.854，P<0.01)；Bax表達與ATN評分呈正相關(guān)(r=0.820，P<0.05)。與ARF組相比，苦碟子干預(yù)組肌酐、尿素氮、肌酸激酶、ATN評分、免疫組化Bax表達均顯著減小(P<0.05)，Bcl-2表達增強(P<0.05)。
　　 (3)第4天ARF組肌

8、酐水平為214.43±26.96umol/L，尿素氮為45.05±7.17mmol/L，肌酸激酶730.07±78.64U/L，ATN評分為3.05±0.38，免疫組化Bcl-2表達20.22±2.03％，Bax表達30.91±3.44％；苦碟子干預(yù)組肌酐水平為171.38±20.11umol/L，尿素氮為33.82±6.03mmol/L，肌酸激酶604.85±41.38U/L，ATN評分為2.83±0.57，免疫組化Bcl-2表達36

9、.52±4.08％，Bax表達26.71±3.25％；它們與正常對照組(分別為52.88±1.99umol/L，6.12±0.86mmol/L，179.82±15.06U/L，0.00±0.00，31.27±3.78％，13.37±2.41％)比較均有顯著性差異(P<0.05)。ARF組Bcl-2表達與ATN評分呈負相關(guān)(r=-0.811，P<0.05)；Bax表達與ATN評分呈正相關(guān)(r=0.841，P<0.01)。與ARF組相比，苦

10、碟子干預(yù)組肌酐、尿素氮、肌酸激酶、ATN評分、免疫組化Bax表達均顯著減小(P<0.05)，Bcl-2表達增強(P<0.05)。
　　 (4)第7天ARF組肌酐水平為128.76±21.26umol/L，尿素氮為19.55±5.25mmol/L，肌酸激酶633.15±63.01U/L，ATN評分為2.60±0.32，免疫組化Bcl-2表達23.16±3.87％，Bax表達27.39±4.66％；苦碟子干預(yù)組肌酐水平為104.93

11、±10.87umol/L，尿素氮為13.63±3.57mmol/L，肌酸激酶462.51±41.99U/L，ATN評分為2.00±0.33，免疫組化Bcl-2表達34.66±3.67％，Bax表達23.48±3.62％；它們與正常對照組(分別為52.88±1.99umol/L，6.12±0.86mmol/L，179.82±15.06U/L，0.00±0.00，31.27±3.78％，13.37±2.41％)比較均有顯著性差異(P<0.0

12、5)。ARF組Bcl-2表達與ATN評分呈負相關(guān)(r=-0.796，P<0.05)；Bax表達與ATN評分呈正相關(guān)(r=0.809，P<0.05)。與ARF組相比，苦碟子干預(yù)組肌酐、尿素氮、肌酸激酶、ATN評分、免疫組化Bax表達均顯著減小(P<0.05)，Bcl-2表達增強(P<0.05)。
　　 (5)第10天ARF組肌酐水平為87.69±12.88umol/L，尿素氮為11.92±2.29mmol/L，肌酸激酶503.61

13、±63.24U/L，ATN評分為1.89±0.37，免疫組化Bcl-2表達25.05±3.16％，Bax表達24.16±2.78％；苦碟子干預(yù)組肌酐水平為68.83±3.14umol/L，尿素氮為9.18±0.97mmol/L，肌酸激酶365.24±55.26U/L，ATN評分為1.33±0.46，免疫組化Bcl-2表達33.62±3.46％，Bax表達17.86±2.94％；它們與正常對照組(分別為52.88±1.99umol/L，6

14、.12±0.86mmol/L，179.82±15.06U/L，0.00±0.00，31.27±3.78％，13.37±2.41％)比較均有顯著性差異(P<0.05)。ARF組Bcl-2表達與ATN評分呈負相關(guān)(r=-0.812，P<0.05)；Bax表達與ATN評分呈正相關(guān)(r=0.797，P<0.05)。與ARF組相比，苦碟子干預(yù)組肌酐、尿素氮、肌酸激酶、ATN評分、免疫組化Bax表達均顯著減小(P<0.05)，Bcl-2表達增強(P

15、<0.05)。
　　 (6)第14天ARF組肌酐水平為55.37±3.27umol/L，尿素氮為6.85±1.34mmol/L，肌酸激酶327.54±26.81U/L，ATN評分為1.34±0.40，免疫組化Bcl-2表達26.42±3.57％，Bax表達17.42±2.59％，它們與正常對照組(分別為52.88±1.99umol/L，6.12±0.86mmol/L，179.82±15.06U/L，0.00±0.00，31.27

16、±3.78％，13.37±2.41％)比較，肌酸激酶、ATN評分、免疫組化Bax表達均顯著升高(P<0.05)，免疫組化Bcl-2表達顯著下降(P<0.05)；ARF組Bcl-2表達與ATN評分呈負相關(guān)(r=-0.783，P<0.05)；Bax表達與ATN評分呈正相關(guān)(r=0.778，P<0.05)?？嗟痈深A(yù)組肌酐水平為53.68±2.06umol/L，尿素氮為6.25±0.78mmol/L，肌酸激酶183.57±17.62U/L，A

17、TN評分為0.75±0.42，免疫組化Bcl-2表達32.87±3.27％，Bax表達13.56±2.17％；它們與正常對照組比較，ATN評分有顯著性差異(P<0.05)。與ARF組相比，苦碟子干預(yù)組ATN評分、免疫組化Bax表達均顯著減小(P<0.05)，Bcl-2表達增強(P<0.05)。
　　 結(jié)論：Bcl-2、Bax的表達與橫紋肌溶解所致急性腎功能衰竭大鼠的腎組織病理改變呈相關(guān)性?？嗟痈深A(yù)可減輕橫紋肌溶解所致急性腎衰竭