2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察大鼠缺血再灌注(I/R)腎損傷術(shù)后硫氧還蛋白-2(TRX2)在腎組織的表達(dá)部位及強度變化。觀察川穹嗪在I/R腎損傷模型中對大鼠腎組織TRX2表達(dá)的影響。
  方法:選取清潔級SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠為實驗對象,重200~250克,36只。隨機分為假手術(shù)組、模型組與川穹嗪組(給藥組),各組12只。川穹嗪組(給藥組):術(shù)前30min腹腔注射2%鹽酸川穹嗪注射液(40mg/kg),術(shù)后每6小時腹腔注射給藥一

2、次。采取切除大鼠右腎后通過夾閉左側(cè)腎動脈45min再恢復(fù)腎內(nèi)血液灌注方式來建立I/R腎損傷模型。模型組模用2ml/kg生理鹽水代替給藥,余操作同給藥組。假手術(shù)組:在切除右腎后僅單純游離左側(cè)腎動脈,但不夾閉,余操作與模型組相同。各組大鼠根據(jù)術(shù)后再灌注時間不同隨機分為2個亞組,各亞組6只,分別于術(shù)后6h和術(shù)后24 h后取血并處死動物,采集腎組織標(biāo)本。采用全自動生化分析法檢測血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)值;在光鏡(LM)觀察腎組織病理

3、變化,用原位TUNEL熒光法檢測細(xì)胞凋亡;用免疫組織化學(xué)法檢測TRX2在腎組織的表達(dá)部位及分布,用Western Blotting定量檢測腎組織中TRX2蛋白的表達(dá)強度。
  結(jié)果:
  1、腎功能的改變:
  與假手術(shù)組術(shù)后6h比較,模型組術(shù)后6h大鼠血肌酐及尿素氮值有升高趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與假手術(shù)組術(shù)后24h比較,模型組術(shù)后24 h大鼠血肌酐及尿素氮明顯升高,Scr113.2±93.3μmol/

4、L VS34.7±4.0μmol/L;BUN34.2±17.2 mmol/L VS11.4±2.9mmol/L,均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值均<0.01)。與模型組術(shù)后6h比較,給藥組術(shù)后6h大鼠血肌酐及尿素氮值均下降,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與模型組術(shù)后24h比較,給藥組術(shù)后24 h大鼠血肌酐及尿素氮明顯下降,Scr32.0±4.1μmol/L VS113.2±93.3μmol/L; BUN11.5±3.3 mmol/LVS34.2±

5、17.2mmol/L,均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值均<0.01)。
  2、光鏡下大鼠腎組織病理表現(xiàn):
  與假手術(shù)組比較,同時間點模型組術(shù)后大鼠均存在不同程度的腎小管損傷,包括腎小管上皮細(xì)胞腫脹,細(xì)胞核固縮,彌漫性刷狀緣脫落,基底膜裸露,管腔擴大,偶見間質(zhì)水腫及中性粒細(xì)胞浸潤,而腎小球內(nèi)固有細(xì)胞、腎內(nèi)小血管內(nèi)皮細(xì)胞均未見明顯損傷。與模型組術(shù)后6h比較,模型組術(shù)后24h大鼠腎組織損傷更明顯,可見腎皮髓交界區(qū)的遠(yuǎn)端腎小管上皮細(xì)胞大片狀

6、凋亡、壞死,脫落至管腔,大量管型形成。與模型組比較,同時間點給藥組術(shù)后大鼠腎小管病理損傷均明顯減輕。
  3、原位TUNEL免疫熒光法顯示:與假手術(shù)組比較,同時間點模型組術(shù)后大鼠腎組織凋亡細(xì)胞增多,在模型組術(shù)后24h大鼠腎組織凋亡細(xì)胞最明顯。與模型組比較,同時間點給藥組術(shù)后大鼠腎組織凋亡細(xì)胞減少。
  5、免疫組化檢測TRX2的表達(dá):假手術(shù)組可見大鼠腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)及腎皮髓交界區(qū)腎小管上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)均有TRX2表達(dá),其中以皮髓

7、交界區(qū)為著,而腎小球固有細(xì)胞、腎內(nèi)小血管內(nèi)皮細(xì)胞、髓襻均未見TRX2表達(dá)。模型組術(shù)后TRX2表達(dá)部位也在腎皮質(zhì)、髓質(zhì)及皮髓交界區(qū)的腎小管細(xì)胞內(nèi),但髓質(zhì)區(qū)腎小管內(nèi)TRX2的表達(dá)變?nèi)酰砜梢姷接斜磉_(dá)TRX2的腎小管細(xì)胞脫落至小管腔內(nèi)。在給藥組術(shù)后6h和24h,均可見TRX2在腎皮質(zhì)、髓質(zhì)及皮髓交界區(qū)的腎小管細(xì)胞內(nèi)廣泛表達(dá)。
  6、Western Blotting檢測TRX2的表達(dá):與假手術(shù)組術(shù)后6h比較,模型組術(shù)后6h大鼠腎組織TR

8、X2的表達(dá)輕度增加,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與假手術(shù)組術(shù)后24h比較,模型組術(shù)后24h大鼠腎組織TRX2表達(dá)明顯減少,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與模型組術(shù)后6h比較,模型組術(shù)后24h大鼠腎組織TRX2的表達(dá)明顯減少,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與模型組術(shù)后6h比較,給藥組術(shù)后6h大鼠腎組織TRX2表達(dá)未見明顯變化。與模型組術(shù)后24h比較,給藥組術(shù)后24h大鼠腎組織內(nèi)TRX2蛋白表達(dá)有增加趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)

9、。
  結(jié)論:
  1.TRX2廣泛表達(dá)于大鼠腎皮質(zhì)、腎髓質(zhì)及腎皮髓交界區(qū)的腎小管上皮細(xì)胞胞漿內(nèi),腎小球固有細(xì)胞、腎內(nèi)小血管內(nèi)皮細(xì)胞、髓襻細(xì)胞均未見TRX2表達(dá)。
  2.在I/R腎損傷術(shù)后的早期,大鼠腎組織內(nèi)TRX2的表達(dá)輕度升高,隨著再灌注時間的延長,部分表達(dá)TRX2的腎小管細(xì)胞凋亡脫落至管腔內(nèi),腎組織內(nèi)TRX2的表達(dá)強度下降。
  3.川穹嗪被證實對大鼠I/R腎損傷有保護作用。
  4.川穹嗪對I/R

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