茯苓交配系統(tǒng)的研究.pdf

1、本文主要從配對試驗、同工酶電泳以及隨機擴增多態(tài)性DNA等方面對茯苓交配系統(tǒng)進行研究，同時對茯苓原生質(zhì)體制備條件進行優(yōu)化，具體結(jié)果如下： 以4個茯苓菌株為材料，對原生質(zhì)體制備條件進行了優(yōu)化，包括原生質(zhì)體產(chǎn)量與再生率2個方面，發(fā)現(xiàn)最適條件為：溶壁酶(Lywallzyme)2％(W/V)，酶解溫度30℃，酶解時間為4h。 原生質(zhì)體分離株、單孢菌株以及出發(fā)菌株的配對表明：無論是同一菌株內(nèi)還是不同菌株間的單孢配對大部分表現(xiàn)為不能和

2、諧生長，兩配對個體間出現(xiàn)明顯的拮抗線。與此相反，同一菌株內(nèi)的原生質(zhì)體分離株問的配對均表現(xiàn)為和諧生長，不同菌株間原生質(zhì)體分離株的配對也可以和諧生長，僅個別配對組合出現(xiàn)拮抗線。所有的原生質(zhì)體分離株與單孢菌株間的配對均出現(xiàn)拮抗線。原生質(zhì)體分離株與其出發(fā)菌株間的配對也能夠和諧生長。 以菌株876為材料制備原生質(zhì)體，從40個原生質(zhì)體分離株中，獲得在菌絲生長速度和羧甲基纖維素(CMC)酶相對活性二者或其中之一與出發(fā)菌株876有顯著差異的16

3、個原生質(zhì)體分離株。同工酶電泳和RAPD分析表明，與876相比供試原生質(zhì)體分離株的過氧化物酶(POD)，同工酶酶譜可分為2種類型，即有副帶無主帶的A類和有主帶無副帶的B類。酯酶(EST)同工酶和RAPD圖譜與876有顯著差異的分離株(主要表現(xiàn)為缺少多條譜帶)可分別對應(yīng)于POD同工酶譜中的A類和B類。據(jù)此最終獲得了分別屬于A類的P12和B類的P38、P29、P34、P3共5個同核原生質(zhì)體分離株。其交配產(chǎn)物的POD同工酶分析表明，同類原生質(zhì)體