生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)修復大鼠神經(jīng)源性勃起功能障礙的研究.pdf

1、本文分三個部分進行探討：
　　第一部分：生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)重建勃起反射通路的研究
　　目的：探討生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)后，再生神經(jīng)形態(tài)學特點及新建立的勃起反射傳出通路的構成。
　　方法：將30只成年雄性Sprague-Dawley大鼠（約250-300g）隨機分為三組，每組10只，假手術組：僅顯露雙側生殖股神經(jīng)及海綿體神經(jīng)，不做離斷。損傷組：離斷雙側生殖股神經(jīng)生殖支及海綿體神經(jīng)，斷端以絲線結扎防止再

2、生。神經(jīng)移位組：離斷雙側生殖股神經(jīng)生殖支及海綿體神經(jīng)后，雙側生殖股神經(jīng)生殖支近端與海綿體神經(jīng)遠端行端端吻合。術后12周，將熒光金溶液（Fluorogold，F(xiàn)G）分別注入各組大鼠右側陰莖腳內行神經(jīng)逆行示蹤研究；再通過各組大鼠遠端海綿體神經(jīng)半薄切片有髓神經(jīng)纖維計數(shù)及電鏡觀察來評估神經(jīng)再生情況，其中神經(jīng)移位組大鼠吻合口段神經(jīng)進一步行縱切面HE染色，以了解吻合口段神經(jīng)的連續(xù)性。
　　結果：逆行神經(jīng)示蹤發(fā)現(xiàn)：損傷組和神經(jīng)移位組大鼠盆神經(jīng)節(jié)

3、內僅見極少量的FG陽性神經(jīng)元，其平均數(shù)量分別為6.3±3.4和5.4±2.9，遠少于假手術大鼠（106.7±15.9）；在各節(jié)段的脊髓切片中，假手術組和損傷組大鼠均未發(fā)現(xiàn)有FG陽性神經(jīng)元存在，而神經(jīng)移位組大鼠脊髓L1，L2前角內可見有FG陽性神經(jīng)元，其平均數(shù)量分別為2.7±1.0，5.3±1.2。神經(jīng)橫斷面半薄切片甲苯胺藍染色顯示：假手術組的海綿體神經(jīng)和神經(jīng)移位組的再生神經(jīng)內均可見豐富藍染的有髓神經(jīng)纖維，其數(shù)量分別為346.8±17.6

4、6和621.87±81.25，明顯高于損傷組遠端海綿體神經(jīng)內有髓神經(jīng)纖維的數(shù)量（16.68±6.08）（P<0.05）；超微電鏡進一步觀察到假手術組和神經(jīng)移位組有大量有髓和無髓神經(jīng)纖維存在，幾乎未見變性壞死的髓鞘；而損傷組可見髓鞘廣泛變性，膠原纖維大量增生。神經(jīng)移位組大鼠吻合口段神經(jīng)HE染色見生殖股神經(jīng)生殖支可以通過吻合口長入海綿體神經(jīng)。
　　結論：生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)后，生殖股神經(jīng)生殖支可以再生長入陰莖海綿體，并建立新

5、的勃起反射傳出神經(jīng)通路（脊髓L1，L2前角運動神經(jīng)元—生殖股神經(jīng)生殖支—再生神經(jīng)—陰莖海綿體）。
　　第二部分：生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)后陰莖勃起功能的研究
　　目的：運用神經(jīng)電生理學和行為學方法，評估大鼠生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)后陰莖勃起功能的恢復情況。
　　方法：將30只成年雄性Sprague-Dawley大鼠（約250-300g）隨機分為三組，每組10只：假手術組，僅顯露雙側生殖股神經(jīng)及海綿體神經(jīng)，不

6、做離斷。損傷組：離斷雙側生殖股神經(jīng)生殖支及海綿體神經(jīng)，斷端以絲線結扎防止再生。神經(jīng)移位組：離斷雙側生殖股神經(jīng)生殖支及海綿體神經(jīng)后，雙側生殖股神經(jīng)生殖支近端與海綿體神經(jīng)遠端行端端吻合。所有大鼠分別于術后4、8、12周行交配試驗，觀察并記錄大鼠的交配行為。術后12周，各組大鼠在熒光金注射一周后分別行海綿體內壓測定，電刺激相應神經(jīng)時，監(jiān)測并記錄每只大鼠陰莖海綿體內壓變化及動脈血壓。
　　結果：術后12周，假手術組和神經(jīng)移位組分別可觀察到

7、8只和7只大鼠有“插入”性行為；而損傷組中僅1只大鼠有“插入”性行為，明顯低于假手術組和神經(jīng)移位組（P<0.05）。電刺激神經(jīng)移位組大鼠生殖股神經(jīng)生殖支（供體神經(jīng)），可見海綿體壓顯著升高，海綿體內壓升高均值（ICP）為32.81±10.8mmHg，可達假手術組大鼠（62.11±7.67 mmHg）的53％；而電刺激損傷組大鼠離斷的海綿體神經(jīng)近端，幾乎未見海綿體內壓升高，測得ICP為5.41±2.02 mmHg，明顯低于神經(jīng)移位組和假手術

8、組（P<0.05）。假手術組、損傷組和神經(jīng)移位組大鼠海綿體壓升高的均值與平均動脈血壓比值（ICP/MAP）分別為：0.63±0.08，0.05±0.02和0.32±0.10，其中神經(jīng)移位組和假手術組測得的比值顯著高于損傷組（P<0.05）。
　　結論：生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)后，部分大鼠可恢復自主交配行為，電刺激大鼠生殖股神經(jīng)生殖支可引起海綿體內壓顯著升高，表明神經(jīng)移位可部分修復大鼠的勃起功能。
　　第三部分：生殖股神

9、經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)后陰莖海綿體NOS的表達及組織形態(tài)學的改變
　　目的：探討生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)后陰莖海綿體 NOS的表達以及組織形態(tài)學的改變。
　　方法：將30只成年雄性Sprague-Dawley大鼠（約250-300g）隨機分為三組，每組10只：假手術組，僅顯露雙側生殖股神經(jīng)及海綿體神經(jīng)，不做離斷。損傷組：離斷雙側生殖股神經(jīng)生殖支及海綿體神經(jīng)，斷端以絲線結扎防止再生。神經(jīng)移位組：離斷雙側生殖股神經(jīng)生殖支及

10、海綿體神經(jīng)后，雙側生殖股神經(jīng)生殖支近端與海綿體神經(jīng)遠端行端端吻合。術后12周，行功能學評估后，分別截取三組大鼠的陰莖海綿體組織，并分為兩段，其中一段采用NADPH染色，于光學顯微鏡下觀察并計數(shù)大鼠每側陰莖背神經(jīng)中藍染的NOS陽性神經(jīng)纖維。另一段則用于Masson染色以了解各組大鼠陰莖海綿體組織形態(tài)學的改變。
　　結果：術后12周，神經(jīng)移位組大鼠每側陰莖背神經(jīng)中均可見大量NOS陽性神經(jīng)纖維，平均數(shù)量為58.67±13.3，明顯高于損

11、傷組（15.53±7.0）（P<0.05），但低于假手術組（128.02±18.1）（P<0.05）。陰莖海綿體 Masson染色可見紅染的為平滑肌細胞，藍染的為膠原成分；三組大鼠陰莖海綿體切片內平滑肌和膠原的面積比分別為0.106±0.015，0.048±0.008和0.086±0.013，其中假手術組和神經(jīng)移位組的比值顯著高于損傷組(P<0.05)。
　　結論：生殖股神經(jīng)生殖支移位海綿體神經(jīng)后，大量 NOS陽性的再生神經(jīng)纖維重