[C14mim]Br-[C14mim]BF4對(duì)小鼠的肝毒性及其作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:通過整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn),來評(píng)估離子液體(ILs)對(duì)小鼠肝臟毒性和抗氧化系統(tǒng)的影響,探討其可能的分子機(jī)制。
　　方法:1)體內(nèi)實(shí)驗(yàn):實(shí)驗(yàn)設(shè)立3個(gè)劑量組(6.18、12.36、24.73 mg·kg-1)和1個(gè)空白對(duì)照組,考察昆明種小鼠分別染毒7 d和14 d后,小鼠的體重、血清生化指標(biāo)、肝臟系數(shù)、組織病理學(xué)的變化。同時(shí)檢測(cè)了抗氧化系統(tǒng)酶活性和丙二醛含量的變化。2)體外實(shí)驗(yàn):采用MTT法分別考察了離子液體(ILs)考察了

2、[C14mim]Br/[C14mim]BF4對(duì)L02和HepG2細(xì)胞的毒性及EC50值;并采用羅丹明123染料熒光法和Western blot法分別檢測(cè)了離子液體對(duì)肝細(xì)胞線粒體膜電位(MMP)和核轉(zhuǎn)錄因子Nrf2蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:染毒后,小鼠的體重總體呈下降,在8-12天時(shí),體重有回升的趨勢(shì),肝臟系數(shù)呈上升的趨勢(shì)。兩種ILs均可使小鼠血清中ALT、AST、DBIL、GLB和γ-GT明顯升高。肝臟SOD、CAT、GSH-P

3、x酶活性下降,MDA含量增加;病理學(xué)檢查顯示,染毒組小鼠的肝組織受到損害,出現(xiàn)水腫、氣球樣變性和點(diǎn)狀壞死。體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,[C14mim]Br/[C14mim]BF4對(duì)兩種肝細(xì)胞的EC50在8-28μM之間,且對(duì) L02細(xì)胞的毒性更強(qiáng);ILs染毒 HepG2細(xì)胞24h后,羅丹明123的熒光強(qiáng)度隨著ILs濃度的增加而下降, MMP發(fā)生了顯著變化;細(xì)胞內(nèi)Nrf2蛋白的表達(dá)隨著ILs濃度的增加,在一定范圍內(nèi)逐漸增強(qiáng),當(dāng)濃度過高時(shí),其表達(dá)則有

4、下降的趨勢(shì)。
　　結(jié)論:[C14mim]Br/[C14mim]BF4可損傷小鼠的肝臟功能,破壞肝臟的抗氧化防御系統(tǒng),造成氧化損傷和脂質(zhì)過氧化。[C14mim]Br/[C14mim]BF4對(duì)L02和HepG2細(xì)胞均有較強(qiáng)的毒性,可破壞肝細(xì)胞線粒體膜結(jié)構(gòu)的完整性引起MMP變化;并在一定范圍內(nèi),可上調(diào)HepG2細(xì)胞內(nèi)Nrf2的表達(dá)來增強(qiáng)機(jī)體的抗氧化能力。[C14mim]Br/[C14mim]BF4對(duì)小鼠肝臟的毒性可能是通過Nrf2/AR