馬精液保存的研究.pdf

1、為了提高精液保存后品質(zhì)，分別對馬精液保存稀釋液、凍前預(yù)處理、冷凍保護(hù)劑和解凍進(jìn)行了研究。 實(shí)驗(yàn)一：進(jìn)行馬精液常溫、低溫和超低溫稀釋液及冷凍劑型的篩選，并比較了不同個體馬精液品質(zhì)差異。結(jié)果表明：(1)常溫保存時， 2.5﹪甘油液和7﹪葡萄糖液精子活率顯著高于5﹪甘油液和0.9﹪Nacl液(P<0.05)，存活時間極顯著高于5﹪甘油液和0.9﹪Nacl液(P<0.01)；(2)低溫保存時，10﹪奶粉液和5﹪卵黃液精子活率顯著高于0.

2、8﹪卵黃液(P<0.05)，極顯著高于7﹪葡萄糖液(P<0.01)，存活時間較0.8﹪卵黃液和7﹪葡萄糖液差異極顯著(P<0.01)；(3)冷凍保存時，11﹪乳糖液、10﹪蔗糖液和4﹪果糖液顆粒凍精活率均極顯著高于0.1﹪EDTA液、3﹪葡萄糖液和1.25﹪Tris液(P<0.01)；細(xì)管凍精活率顯著高于3﹪葡萄糖液和1.25﹪Tris液(P<0.05)，極顯著高于0.1﹪EDTA液(P<0.01)，且同一種稀釋液的顆粒凍精和細(xì)管凍精的

3、凍后活率和復(fù)蘇率差異顯著(P<0.05)。10﹪蔗糖液和4﹪果糖液凍后精子頂體完整率極顯著高于11﹪乳糖液(P<0.01)，畸形率顯著高于11﹪乳糖液(P<0.05)，顆粒和細(xì)管凍精差異不顯著(P>0.05)；(4)馬原精活力和凍后精子活率存在個體差異(P<0.05)。 實(shí)驗(yàn)二：初步探討了凍前預(yù)處理對馬精液保存效果的影響。結(jié)果表明：(1)相同離心速度離心7min，10min凍后精子活率及復(fù)蘇率顯著高于離心15min的(<0.05

4、)：但2000r/min和3000r/min離心后精子活力較1000r/min和1500r/min顯著下降；1000r/min和1500r/min分別離心7min，10min凍后精子活力和復(fù)蘇率差異不顯著(P>0.05)；(2)精液與精清比在1/1和1/2時，其凍后活率及復(fù)蘇率顯著高于0/1和1/4時(P<0.05)；(3)精液與稀釋液之比為1∶2和1∶3時其凍后精子活力和復(fù)蘇率顯著高于1∶1(P<0.05)；(4)精液平衡2h、3h和

5、4h凍后精子活力和復(fù)蘇率差異均不顯著(P>0.05)；(5)采用銅網(wǎng)和氟板為冷凍材質(zhì)時凍后精子活力和復(fù)蘇率極顯著高于采用鋼板(P<0.01)：(6)液氮熏蒸法凍后精子活力和復(fù)蘇率極顯著高于直接投入液氮法(P<0.01．)；(7)在始凍溫度為-80℃、110℃和-140℃下分別熏蒸5min、7min、10min和15min，其凍后精子活力和復(fù)蘇率差異均不顯著(P>0.05)。 實(shí)驗(yàn)三：初步研究了不同冷凍保護(hù)劑和解凍方法對馬精液保存

6、效果的影響。結(jié)果表明： (1)當(dāng)用國產(chǎn)甘油、進(jìn)口甘油、甘油+DMSO作為冷凍保護(hù)劑時其凍后精子活力和復(fù)蘇率顯著(P<0.05)高于用乙二醇和DMSO作為保護(hù)劑。(2)3.8﹪、5﹪、6﹪甘油濃度解凍后精子活力和復(fù)蘇率顯著(P<0.05)高于7﹪甘油濃度，極顯著(P<0.01)高于9﹪甘油濃度：(3)0.1﹪EDTA解凍液凍后精子活力和復(fù)蘇率顯著(P<0.05)高于其它6﹪蔗糖、2.9﹪檸檬酸鈉、5﹪葡萄糖解凍液，畸形率和項(xiàng)體完整

7、率顯著(P<0.05)f氐于6﹪蔗糖和2.9﹪檸檬酸鈉，與5﹪葡萄糖解凍液差異不顯著(P>0.05)。(4)干解凍和濕解凍對凍后精子活力、復(fù)蘇率、畸形率和頂體完整率等沒有顯著影響(P>0.05)。(5)58℃和78℃解凍后其精子活力和復(fù)蘇率顯著(P<0.05)高于38℃下解凍，極顯著(P<0.01)高于4℃下解凍，但凍后精子畸形率和頂體完整率差異均不顯著(P>0.05)。 研究表明，馬精液常溫保存時，7﹪葡萄糖液保存效果最好；低