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文檔簡(jiǎn)介
1、由于豬精子冷凍后成活率、人工授精繁殖率較低,使得豬精液冷凍保存技術(shù)難以得到推廣。為了進(jìn)一步提高冷凍-解凍后豬精液品質(zhì)和精子抵抗低溫打擊的能力,本試驗(yàn)以甘露醇、絞股藍(lán)多糖、馬齒莧多糖和海帶多糖作為冷凍保護(hù)劑,以冷凍解凍后精子的活力、活率、線(xiàn)粒體活性、質(zhì)膜完整率和頂體完整率作為評(píng)價(jià)指標(biāo),利用碘化丙啶(PI)、羅丹明123、低滲腫脹試驗(yàn)(HOST)和異硫氰酸熒光素連接的花生凝集素(PITC-PNA)分別檢測(cè)了精子的活力、線(xiàn)粒體活性、質(zhì)膜完整率
2、和頂體完整率。同時(shí)研究了不同的冷凍前處理和甘油含量對(duì)精液冷凍后精子的活力、活率、線(xiàn)粒體活性、質(zhì)膜完整率和頂體完整率以及冷凍解凍對(duì)抗氧化酶活性的影響,得到如下結(jié)果: 1.豬精液冷凍過(guò)程中,在傳統(tǒng)的稀釋液TCG基礎(chǔ)上,添加2 mg/mL,的甘露醇、0.25-0.5mg/mL的絞股藍(lán)多糖、0.25 mg/mL的馬齒莧多糖、0.5-1.5 mg/mL的海帶多糖均可提高豬精子凍后活力、活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整率和線(xiàn)粒體活性(P<0.05
3、)。整體來(lái)看,海帶多糖的保護(hù)效果較好。 2.在對(duì)精液冷凍前預(yù)處理中:采用先平衡,后棄精漿的精液處理程序;棄去6/7的精漿;稀釋液中甘油濃度為3%,分別含有2 mg/mL甘露醇、0.5 mg/mL絞股藍(lán)多糖、0.25 mg/mL馬齒莧多糖和1mg/mL海帶多糖時(shí),均取得了較好的冷凍解凍效果(p<0.05)。 3.平衡、冷凍解凍對(duì)精子內(nèi)SOD、CAT和GSH-Px酶活力都有影響。整個(gè)冷凍過(guò)程中,精子內(nèi)三種酶活力均呈下降趨勢(shì);
4、添加不同濃度的三種多糖,以TCG作為對(duì)照,檢測(cè)平衡后和冷凍解凍后精子內(nèi)SOD、CAT、GSH-Px三種酶的活力。平衡后,絞股藍(lán)多糖添加組和馬齒莧多糖添加組中,精子內(nèi)三種酶活力與對(duì)照組比較差異不顯著(p>0.05);添加0.5和1.0 mg/mL海帶多糖的精子中SOD活力下降的較少(p<0.05);添加1.0mg/mL的海帶多糖時(shí),CAT酶活力與對(duì)照組比較差異顯著(p<0.05)。冷凍解凍后,添加0.5mg/mL-1.0 mg/mL絞股藍(lán)
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