山杏良種資源的RAPD分析.pdf

1、山杏(Armeniaca．sibirica(L．)Lam．)，薔薇科，李亞科，杏屬，通常為落葉灌木或喬木，耐寒、耐旱、耐瘠薄等，杏仁營養(yǎng)豐富，具有很高的經(jīng)濟(jì)、藥用價值，葉、花、樹皮、樹根也均可入藥。主要分布于河北、遼寧及內(nèi)蒙古等地，作為防風(fēng)固沙的優(yōu)勢樹種。過去對山杏的研究主要集中在栽培、嫁接技術(shù)等方面，而選育種、資源分類等方面的研究較少，本試驗(yàn)在張家口赤城縣進(jìn)行豐產(chǎn)、晚花及其他特異類型初選的基礎(chǔ)上，結(jié)合表型性狀，利用RAPD分子標(biāo)記技術(shù)

2、對初選種質(zhì)進(jìn)行了分類和遺傳關(guān)系分析，為山杏種內(nèi)分類、種質(zhì)特性和遺傳改良等研究提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下： 1)以山杏新鮮葉片為材料，研究了山杏RAPD分析過程中的影響因素，包括Taq DNA聚合酶、Mg<'2+>、dNTP、引物、模板DNA、Buffer濃度，建立了適合山杏RAPD反應(yīng)的PCR體系，即20μL反應(yīng)體系中含有Taq DNA聚合酶1.0U，Mg<'2+>2.0mM，4種dNTP各0.1mM，引物0.5μM，模板DNA

3、50ng，Buffer1×。 2)擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性4min；94℃變性1min，36℃退火1min，72℃延伸1.5min，10個循環(huán)：94℃變性30s，36℃退火40s，72℃延伸60s，30個循環(huán)：最后72℃延伸5min。 3)從S系列47個引物中篩選出能穩(wěn)定擴(kuò)增的18個引物，用這些引物對22個山杏優(yōu)株進(jìn)行擴(kuò)增，均具有多態(tài)性。共擴(kuò)增出138條帶，每個引物擴(kuò)增的DNA帶數(shù)在5～14條之間，平均每個引物擴(kuò)增6.2