葉面噴施肥五種氮肥對(duì)葡萄生長(zhǎng)發(fā)育及氮代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、氮肥的吸收和同化對(duì)于植物的發(fā)育和成長(zhǎng)非常重要。本研究通過(guò)對(duì)不同株藤稔葡萄分別噴施尿素、硝酸銨、硫酸銨、氯化銨、硝酸鈉五種分析純肥料，先是測(cè)定葡萄枝葉生理性狀，利用萃取法測(cè)定處理葉片葉綠素含量，對(duì)凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)和胞間CO2濃度(Ci)等光合特性參數(shù)變化情況進(jìn)行測(cè)定，后利用VitisEST數(shù)據(jù)庫(kù)中EST序列片段結(jié)合RT-PCR方法克隆與氮代謝相關(guān)的5個(gè)酶的編碼基因:硝酸鹽還原酶(NR)，亞硝酸還原酶(

2、NiR)，谷氨酰胺合成酶(GS)，谷氨酸脫氫酶(GDH)和天冬酰胺合成酶(AS)，運(yùn)用熒光定量PCR法研究了上述各基因在葡萄葉面不同處理后的表達(dá)情況。旨在為葡萄栽培管理以及科學(xué)施肥提供一定理論依據(jù)，對(duì)氮肥的合理應(yīng)用具有一定指導(dǎo)意義。具體主要研究結(jié)果如下:
　　1.本研究選取3個(gè)位于固定節(jié)位的新梢于施肥前和施肥后15d測(cè)量其新梢長(zhǎng)和成熟葉的長(zhǎng)與寬，計(jì)算新梢增長(zhǎng)率和葉片增長(zhǎng)率以及葉面積。使用游標(biāo)卡尺測(cè)量果實(shí)縱橫徑，通過(guò)電子天平稱(chēng)量單個(gè)

3、果實(shí)質(zhì)量。結(jié)果表明各處理均能在不同程度上提高葡萄新梢增長(zhǎng)率，尿素和硝酸銨處理極大地促進(jìn)了葉片的生長(zhǎng)。對(duì)果實(shí)影響最大的是硫酸銨和尿素，氯化銨對(duì)果實(shí)大小影響相對(duì)較小。
　　利用英國(guó)PP-System公司的CIRAS-1光合測(cè)定系統(tǒng)，采用開(kāi)放式氣路測(cè)定凈光合速率(Pn)、蒸騰速率(Tr)、氣孔導(dǎo)度(Gs)和胞間CO2濃度(Ci)等參數(shù)。表明尿素處理對(duì)蒸騰速率各時(shí)段均有影響且最大，硝酸銨、硫酸銨以及氯化銨對(duì)一天中后半時(shí)段的蒸騰速率有影響;

4、尿素處理對(duì)氣孔導(dǎo)度的影響最大，這與蒸騰速率的處理效果一致;各處理Ci的變化趨勢(shì)并不完全一致，但各處理多數(shù)時(shí)段的Ci值變大，促進(jìn)了光合作用的進(jìn)行;凈光合速率在一天中的變化呈“雙峰”型曲線，各處理對(duì)于“午休”時(shí)段的凈光合速率影響不明確，對(duì)一天中其他時(shí)段提高了凈光合速率，其中尿素的影響效果最為顯著。
　　2.運(yùn)用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)5個(gè)葡萄氮代謝基因VvGHD(JF796045)、VvNiR(JF796046)、VvNR(JF79604