姜桂散抗類風(fēng)濕緩釋制劑研究.pdf

1、本文針對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎之“寒濕痹阻證”,以“行氣活血、溫經(jīng)通絡(luò)”為基本治療原則,以姜桂散(《圣濟(jì)總錄》)為研究對(duì)象,分別提取兩味藥的有效部位,得到合格的中間體。在此基礎(chǔ)上,利用緩釋技術(shù)制備了現(xiàn)代中藥復(fù)方緩釋制劑——姜桂風(fēng)濕緩釋膠囊,并對(duì)其進(jìn)行了綜合質(zhì)量評(píng)價(jià),藥效學(xué)研究及作用機(jī)理的初步探索。主要研究?jī)?nèi)容如下:
　　姜桂散由姜黃、肉桂二味藥組成,為確定處方中姜黃和肉桂的用量和比例,結(jié)合處方的功能主治和所治類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的病理特點(diǎn),采用基

2、線等比增減設(shè)計(jì)進(jìn)行了不同配伍比例組合對(duì)小鼠二甲苯耳腫脹、對(duì)醋酸所致小鼠扭體次數(shù)的影響等試驗(yàn)。結(jié)果表明:姜黃:肉桂為2:1配伍組抗炎作用、鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng),為最佳配伍比例。
　　根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo),結(jié)合藥效學(xué)試驗(yàn),對(duì)姜黃、肉桂的抗炎、鎮(zhèn)痛有效部位進(jìn)行了篩選,結(jié)果表明:姜黃有效部位為姜黃色素,肉桂有效部位為肉桂揮發(fā)油。
　　對(duì)川產(chǎn)道地藥材姜黃,從資源合理利用的角度出發(fā),根據(jù)其主要有效部位之一姜黃色素的理化性質(zhì),通過正交試驗(yàn)確定了姜黃色素工

3、藝條件為:6倍量70％乙醇滲濾提取,減壓回收乙醇,即得姜黃油樹脂。在系統(tǒng)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用丙酮-石油醚混合溶劑進(jìn)行有效部位純化研究,經(jīng)正交試驗(yàn)篩選,確定姜黃色素分離純化工藝為:姜黃油樹脂用10倍量丙酮溶解,加入丙酮3倍量的石油醚(邊加邊攪),靜置4小時(shí)。上清液減壓回收丙酮,析晶,過濾,干燥。
　　研究并建立了姜黃色素中間體的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),為姜黃的綜合利用提供了一條重要途徑。
　　采用水蒸汽蒸餾法,以肉桂油得量為指標(biāo),通過正交試驗(yàn)

4、確定了肉桂的主要有效部位肉桂油最佳提取工藝:肉桂藥材加6倍量水,浸泡1小時(shí),水蒸汽蒸餾5小時(shí),收取揮發(fā)油。研究表明,所得肉桂油符合現(xiàn)行版藥典肉桂油項(xiàng)下相關(guān)規(guī)定,為制備受試藥組提供了合格的中間體。
　　根據(jù)篩選的處方兩種藥材的配比與用量,結(jié)合中間體的收率計(jì)算出一日用量為240mg。在制劑成型工藝研究中,根據(jù)姜黃素類化合物水溶性較差的性質(zhì),結(jié)合臨床需要以及固體分散技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),以EC為載體,PVPk30為釋放調(diào)節(jié)劑,用溶劑法制備了緩釋固

5、體分散體。并以桂皮醛和姜黃素的體外累積釋放度為指標(biāo),通過單因素試驗(yàn)篩選出最佳制劑處方為EC:PVPk30:藥物(3:1:1)。通過X射線衍射試驗(yàn)、DSC試驗(yàn)考察藥物在緩釋固體分散體中的分散狀態(tài),結(jié)果顯示藥物在固體分散體中以分子狀態(tài)存在。利用緩釋固體分散技術(shù),較好地解決了姜黃色素溶解性差致生物利用度低的問題。
　　對(duì)姜桂風(fēng)濕緩釋膠囊的質(zhì)量評(píng)價(jià)體系進(jìn)行了較系統(tǒng)研究,包括制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立、體外釋放度試驗(yàn)。在制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中,研究并建

6、立了本品中姜黃素、肉桂醛的TLC鑒別方法;建立了本品中姜黃色素的UV含量測(cè)定方法和姜黃素的HPLC含量測(cè)定方法;建立了本品中桂皮醛的HPLC含量測(cè)定方法;體外釋放度試驗(yàn)結(jié)果表明,姜桂風(fēng)濕緩釋膠囊12小時(shí)內(nèi)緩釋效果良好,姜黃色素、肉桂油在體外的釋放基本符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過程。
　　本品藥效學(xué)試驗(yàn),結(jié)果對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹、角叉菜膠局部注射誘發(fā)大鼠足爪腫脹、大鼠胸腔白細(xì)胞游走、小白鼠腹腔毛細(xì)血管通透性以等有明顯抑制作用;對(duì)小鼠棉球肉芽腫

7、有抑制作用;對(duì)熱板、醋酸致小鼠疼痛模型有明顯抑制作用,有一定鎮(zhèn)痛作用。對(duì)正常小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬作用有明顯抑制作用;對(duì)DNCB誘發(fā)DTH反應(yīng)及血清溶血素抗體生成有明顯抑制作用。能改善佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠(adjuvant arthritis AA)原發(fā)病變和繼發(fā)病變。能降低佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠(AA)血清中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,及一氧化氮合成酶(NOS)活力;提高超氧化物歧化酶(SOD)活力?？山档妥魟┬躁P(guān)節(jié)炎大鼠(AA)血清