2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  1、檢測8個(gè)微衛(wèi)星(Microsatellite,MS)位點(diǎn)BAT-25、BAT-26、D8S264、D8S135、D9S1748、D9S942、D11S2077及 D11S4111的微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(Microsatellite instability,MSI)在散發(fā)性結(jié)直腸癌(Sporadic colorectal cancer,SCRC)中的發(fā)生頻率、分類,并探討MSI與臨床病理特征的關(guān)系。
  2、檢測hM

2、LH1基因、p16基因、TSLC1基因啟動(dòng)子在SCRC中的甲基化狀態(tài),探討各基因甲基化狀態(tài)與臨床病理特征的關(guān)系以及這三個(gè)基因啟動(dòng)子異常甲基化在SCRC中的診斷價(jià)值。
  3、觀察SCRC各MSI分類組hMLHl基因、p16基因、TSLC1基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài),探討hMLHI基因、p16基因及TSLC1基因啟動(dòng)子甲基化和MSI的關(guān)系,以期進(jìn)一步了解SCRC的發(fā)生機(jī)制。
  方法:
  1、提取45例SCRC患者癌組織和

3、癌旁組織中的DNA,采用PCR、變性聚丙烯酰胺凝膠電泳及硝酸銀染色法檢測8個(gè)MS位點(diǎn)的MSI。
  2、將45例SCRC患者癌組織和癌旁組織的DNA用甲基化試劑盒修飾后,采用特異性甲基化PCR(Methylation specific PCR,MSP)方法檢測hMLHl基因、p16基因及TSLC1基因啟動(dòng)子的甲基化狀態(tài)。
  結(jié)果:
  1、8個(gè)MS位點(diǎn)中除了D8S135外其余7個(gè)MS位點(diǎn)均發(fā)生了一定頻率的MSI(9.

4、5%~24.4%),其中D8S264(20.9%)、D9S942(19.0%)和D11S4111(24.4%)三個(gè)位點(diǎn)MSI發(fā)生頻率較高。各MS位點(diǎn)的MSI發(fā)生頻率在性別、年齡、腫瘤大小、病理類型、Dukes分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。
  2、聯(lián)合8個(gè)位點(diǎn)MSI的發(fā)生頻率,低齡組MSI的發(fā)生頻率(70.0%,14/20)顯著高于高齡組(24.0%,6/25);無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(DukesA+B)MSI的

5、發(fā)生頻率(55.2%,16/29)顯著高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(DukesC+D)(25.0%,4/16),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。性別、腫瘤部位、腫瘤大小和病理類型組組間MSI發(fā)生率比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。
  3、45例SCRC患者中有45.4%(20/45)的標(biāo)本至少在一個(gè)位點(diǎn)上發(fā)生了MSI,其中高頻的微衛(wèi)星不穩(wěn)定(high-frequency microsatellite instability,MSI-H)占15

6、.6%(7/45),低頻微衛(wèi)星不穩(wěn)定(low-frequency microsatellite instability,MSI-L)占28.9%(13/45),微衛(wèi)星穩(wěn)定(microsatellite stability,MSS)占55.6%(25/45)。
  4、MSI-H在性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、病理類型、Dukes分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組組間比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。
  5、45例SCRC中,三個(gè)基因啟

7、動(dòng)子在癌組織甲基化率均明顯高于癌旁正常組織組,hMLH1基因(37.8% Vs15.6%)、p16基因(60.0% Vs31.1%)、TSLC1基因(73.3% Vs53.3%),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
  6、45例SCRC中,hMLH1基因、p16基因、TSLC1基因啟動(dòng)子甲基化在性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、病理分型、Dukes分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組組間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。
  7、在45例SCRC

8、中,MSI-H組hMLH1基因啟動(dòng)子甲基化發(fā)生率顯著高于MSI-L和MSS組(85.7% Vs30.8%和28.0%),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。MSI-H組p16基因和TSLC1基因甲基化發(fā)生率與MSI-L和MSS組相比,均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O.05)。
  8、聯(lián)合hMLH1基因、p16基因和TSLC1基因三個(gè)基因啟動(dòng)子甲基化情況,發(fā)現(xiàn)至少一個(gè)基因啟動(dòng)子甲基化的發(fā)生率為91.1%(41/45),3個(gè)基因啟動(dòng)子同時(shí)甲基化的發(fā)

9、生率為17.8%(8/45)。
  結(jié)論:
  1、MSI是SCRC的一個(gè)常見的分子改變,且D8S264、D9S942、 D11S4111可能是檢測SCRC的MSI較為敏感的微衛(wèi)星位點(diǎn)。
  2、hMLH1、p16和TSLC1三個(gè)基因啟動(dòng)子甲基化均是SCRC中常見的表觀遺傳事件,是SCRC發(fā)生的早期分子事件。
  3、hMLH1基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平與微衛(wèi)星MSI密切相關(guān),推測hMLH1基因啟動(dòng)子甲基化使hMLH

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