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文檔簡介
1、目的:創(chuàng)傷性關節(jié)炎(Post-traumatic arthritis,PTA)的發(fā)病原因尚不清楚,大量炎性介質(zhì)的釋放在關節(jié)損傷中扮演了重要角色,尤以IL-1受到格外關注。RNA干擾技術(shù)(RNAi)能夠高效阻斷哺乳動物細胞內(nèi)基因表達。本研究借助此項技術(shù),設計并篩選出能高效抑制IL-1基因表達的小型干擾RNA(small interferingRNA,siRNA),經(jīng)慢病毒載體介導轉(zhuǎn)染人滑膜細胞,從而有效減少滑膜細胞中IL-1基因的表達,以
2、探索創(chuàng)傷性關節(jié)炎基因治療切實可行的方法。
方法:設計合成3對不同的并且能抑制IL-1基因表達的siRNA,采用RT-PCR方法檢測細胞上清液中IL-1表達水平,并采用ELISA方法檢測細胞上清液IL-1表達水平。
結(jié)果:對照組相比,3對siRNA中均可有效減少人滑膜細胞中IL-1表達增加(P<0.01),同時細胞上清液中IL-1分泌量下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
討論:成功設計合成了靶向抑制IL
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