補(bǔ)腎化瘀生新方對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性調(diào)控作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討補(bǔ)腎化瘀生新方對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性的調(diào)控作用及其延緩細(xì)胞衰老的機(jī)制。
　　方法：40只SPF級(jí)SD大鼠隨機(jī)分為補(bǔ)腎化瘀生新組和對(duì)照組，補(bǔ)腎化瘀生新組為補(bǔ)腎化瘀生新方灌胃，對(duì)照組生理鹽水灌胃，連續(xù)灌胃7天，早晚各一次。第7天首次灌胃2h后腹主動(dòng)脈取血制備含藥血清；100只SD新生乳鼠進(jìn)行BMSCs的提取、培養(yǎng)及分離純化，用4g/L D-gal誘導(dǎo)建立BMSCs衰老模型。將自然衰老及衰老模型組隨機(jī)分為補(bǔ)腎化瘀

2、生新組和對(duì)照組，將制備好的含藥血清直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。光鏡觀察每組各代 BMSCs的形態(tài)變化；MTT法檢測(cè)各組不同濃度血清BMSCs細(xì)胞活性的變化；比色法檢測(cè)自然衰老各組及衰老模型各組β-半乳糖苷酶活性變化。
　　結(jié)果：光鏡下見(jiàn)正常培養(yǎng)的BMSCs形態(tài)均一，呈長(zhǎng)梭形、三角形，并呈漩渦樣生長(zhǎng)，衰老模型組 BMSCs多呈扁三角形、橢圓形，且生長(zhǎng)緩慢；根據(jù) MTT細(xì)胞增殖結(jié)果可知第1天和第2天時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)較慢，處于增殖潛伏期，在第3天時(shí)開(kāi)始