益生菌VSL#3對(duì)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎和腸易激綜合征大鼠的療效及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、目的
　　 探討益生菌VSL#3對(duì)腹瀉型IBS大鼠的療效及腸黏膜緊密連接蛋白和MAPK信號(hào)通路蛋白(p38MAPK、ERK和JNK)的影響,為進(jìn)一步探索益生菌VSL#3治療腹瀉型IBS的機(jī)制提供幫助。
　　 方法
　　 Wistar大鼠40只,雌雄各半,體重(200±5)g,購(gòu)自中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,飼養(yǎng)于清潔級(jí)動(dòng)物房,隨機(jī)分成5組,每組8只,飼養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)條件下(濕度50%±10%;12h白晝/12h黑夜輪換)

2、,喂食普通大鼠飼料。分組情況如下:(1)IBS模型組:乙酸灌腸+束縛應(yīng)激造模;(2)生理鹽水組:乙酸灌腸+束縛應(yīng)激造模+NS灌胃;(3)益生菌VSL#3組:乙酸灌腸+束縛應(yīng)激造模+益生菌VSL#3灌胃;(4)思密達(dá)組:乙酸灌腸+束縛應(yīng)激造模+思密達(dá)灌胃;(5)正常對(duì)照組:正常飲食,無特殊處理。實(shí)驗(yàn)期間每日觀察大鼠進(jìn)食、飲水、活動(dòng)等一般情況,稱量體重,觀察糞便性狀,對(duì)糞便類型進(jìn)行計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)第7天,計(jì)算AWR評(píng)分,評(píng)估內(nèi)臟敏感性。于結(jié)腸距肛

3、門8cm處剪取0.5cm長(zhǎng)的結(jié)腸組織數(shù)塊,一部分于中性福爾馬林中固定,石蠟包埋切片做HE染色和免疫組化檢測(cè)腸黏膜緊密連接蛋白(occludin和ZO-1),其余結(jié)腸組織液氮保存用作Western blot檢測(cè)腸黏膜緊密連接蛋白(occludin和ZO-1)和MAPK信號(hào)通路蛋白(p38MAPK、ERK、JNK和P-p38MAPK、P-ERK、P-JNK)的表達(dá)水平。
　　 結(jié)果
　　 益生菌VSL#3組大鼠腹瀉癥狀較IB

4、S模型組大鼠明顯緩解,AWR評(píng)分較IBS模型組和思密達(dá)組明顯降低。光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)各組大鼠結(jié)腸黏膜均未見明顯病理學(xué)改變,免疫組化和Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)益生菌VSL#3組大鼠腸黏膜緊密連接蛋白(occludin和ZO-1)表達(dá)水平明顯高于IBS模型組和思密達(dá)組,Western blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)益生菌VSL#3組大鼠腸黏膜P-p38MAPK和P-ERK蛋白表達(dá)水平明顯高于其它組,而各組大鼠腸黏膜P-JNK蛋白的表達(dá)水平則無明顯差異