線粒體靶向性肽Ss-31對人眼小梁細(xì)胞抗氧化應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究線粒體靶向性肽SS-31對過氧化氫(H2O2)處理的人眼小梁細(xì)胞(Human Trabecular Meshwork Cells，HTMCs)氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及可能的機(jī)制，為青光眼的藥物治療及預(yù)防提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:將永生化的小梁細(xì)胞（深圳眼科醫(yī)院劉旭陽教授惠贈）進(jìn)行培養(yǎng)傳代后隨機(jī)分為5組。正常組:正常培養(yǎng)的HTMCs;對照組（H2O2處理組）:正常培養(yǎng)的HTMCs+過氧化氫（100 umol/L，處理24h

2、）;實(shí)驗(yàn)組（SS-31預(yù)處理組）:正常培養(yǎng)的HTMCs+SS-31（SS-31濃度分別為10 nM、100 nM、1μM，處理2h）+過氧化氫（100 umol/L，處理24h）。應(yīng)用MTT法檢測各組細(xì)胞的存活率，流式細(xì)胞儀檢測各組細(xì)胞的凋亡率，采用DCFH-DA探針檢測細(xì)胞內(nèi)的ROS，ELISA檢測細(xì)胞色素C(cytochrome C，CytC)的釋放，PT-PCR檢測caspase-3 mRNA的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1.與對

3、照組相比，各個(gè)SS-31預(yù)處理組小梁網(wǎng)細(xì)胞的凋亡率均降低，細(xì)胞內(nèi)ROS生成減少，CytC釋放均減少，caspase-3 mRNA表達(dá)水平均減少，結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。2.不同濃度的SS-31組間隨SS-31濃度增加，細(xì)胞凋亡率降低，細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生減少，CytC釋放減少，caspase-3 mRNA表達(dá)水平降低，各組間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。3.與正常組相比，各SS-31組細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞內(nèi)ROS生成、CytC釋