涼膈散湯劑HPLC--DAD指紋圖譜及其主要成分抗炎作用初步研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級碩士學(xué)位論文涼膈散湯劑Ⅷ)LCDAD指紋圖譜及其主要成分抗炎作用初步研究HPLC—DADfingerprintofLianggesanDecoctionandanti—innammatOryeffectsofthemaincomponents課題來源：國家自然科學(xué)基金學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院胡建蘭余林中教授中藥學(xué)學(xué)術(shù)型碩士研究生中醫(yī)藥學(xué)院答辯委員會(huì)主席王汝俊答辯委員會(huì)委員李衛(wèi)東佟麗覃仁安范

2、欽2014年5月23日廣州摘要含量的方法，為該方的物質(zhì)基礎(chǔ)研究及質(zhì)量控制提供了科學(xué)依據(jù)，形成該方整體特征的質(zhì)量評價(jià)方法。同時(shí)運(yùn)用該方水提液濃縮干燥粉末以及方中主要成分連翹酯苷A和黃芩苷進(jìn)行細(xì)胞水平的初步抗炎實(shí)驗(yàn)研究。2、實(shí)驗(yàn)方法21涼膈散湯劑指紋圖譜研究及其主要成分連翹酯苷A、黃芩苷、大黃酸的含量測定采用HPLC法，二極管陣列檢測器(DAD)，Zorba)(Eclipse)①BC18色譜柱(250nun46mm，5岬)，以甲醇O1％磷酸

3、水溶液為流動(dòng)相，二元梯度洗脫；流速1mL／min；柱溫38℃，檢測波長235m；進(jìn)樣量10此；檢測時(shí)間85min。以黃芩苷作為參照峰，測定10批涼膈散湯劑及各缺味藥材陰性對照色譜圖，對涼膈散湯劑整體質(zhì)量進(jìn)行分析，運(yùn)用指紋圖譜相似度評價(jià)軟件評價(jià)十批藥材的相似度，并對全方特征峰進(jìn)行藥味歸屬分析，在一定程度上闡述了涼膈散湯劑的物質(zhì)基礎(chǔ)。在此色譜條件下同時(shí)測定5批藥材中連翹酯苷A、黃芩苷、大黃酸的含量，建立其含量測定方法，為涼膈散湯劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的

4、建立提供參考。22涼膈散、黃芩苷、連翹酯苷A對&刪2647細(xì)胞毒性研究RAW2647細(xì)胞用低糖DMEM培養(yǎng)基在37℃、5％C02的環(huán)境下培養(yǎng)，待細(xì)胞生長至90％時(shí)，胰酶消化1：3傳代。取對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，調(diào)整細(xì)胞濃度為1104／孔接種于96孔板中。實(shí)驗(yàn)分為正常對照組和給藥組，給藥組給予不同濃度連翹酯苷A、黃芩苷、涼膈散溶液，MTT法測定不同濃度涼膈散、黃芩苷、連翹酯苷A對RAW2647細(xì)胞細(xì)胞毒性大小，通過OD值計(jì)算細(xì)胞存活率，確