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1、中藥材單面針(學(xué)名蜆殼花椒Zanthoxylum dissitum Hemsl)為蕓香科花椒屬植物,能祛風(fēng)活絡(luò)、散瘀止痛、解毒消腫,是許多中成藥組方中的主要成分,具有良好的發(fā)展前景。目前,單面針完全處于野生狀態(tài),隨著需求量的增大,單面針野生資源逐年減少,正面臨著資源匱乏與生態(tài)破壞的雙重危機(jī)。為更好的開發(fā)利用這一中藥,控制其質(zhì)量,本課題對(duì)單面針的質(zhì)量進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,主要研究結(jié)果如下:
(1)建立了一種測(cè)定單面針?biāo)幉闹邪柞r堿
2、含量的高效液相色譜(HPLC)分析方法。以產(chǎn)于湖北恩施、湖南張家界和貴州銅仁3個(gè)主產(chǎn)區(qū)的單面針和經(jīng)人工快繁栽培于長(zhǎng)沙的單面針為材料,采用超聲波輔助提取,色譜柱為SinoChromODS-BPC18柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.01mol/L磷酸二氫鈉緩沖液(50∶50)為流動(dòng)相,流速0.8mL/min,在波長(zhǎng)236nm處進(jìn)行白鮮堿含量檢測(cè)。方法簡(jiǎn)便易行,數(shù)據(jù)可靠,為單面針?biāo)幉牡馁|(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)提供了一種科學(xué)的、可行的檢測(cè)
3、方法。
(2)單面針?biāo)幉腍PLC指紋圖譜方法的建立。以單面針為研究對(duì)象,詳細(xì)考察了其藥用部位的色譜分離條件,包括供試品溶液制備、色譜條件等影響因素,初步確定了單面針?biāo)幉牡腍PLC指紋圖譜的建立方法,以80%甲醇溶液為提取溶劑,超聲波震蕩30min,制備單面針?biāo)幉臉悠啡芤?選用AgilentEclipseXDBC18柱色譜柱,以水+0.1%TFA(A)-乙腈(B)為流動(dòng)相,按非線性梯度洗脫條件:0~35min,8%~35%A
4、;35~50min,35%~70%A;50~65min,70%~80%;65~70min,80%~8%,進(jìn)行梯度洗脫,選檢測(cè)波長(zhǎng)254nm,流速為0.8mL/min,并通過(guò)精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。
(3)不同產(chǎn)地單面針HPLC指紋圖譜的建立。按照確定的指紋圖譜建立方法,對(duì)13批單面針?biāo)幉倪M(jìn)行測(cè)定,初步建立了單面針?biāo)幉闹讣y圖譜,確定其中的16個(gè)共有峰作為指紋圖譜的特征組成,并生成了單面針指紋圖譜的共有模式。采用相
5、似度作為指紋圖譜的評(píng)判參數(shù),計(jì)算了不同批次間的相似度,相似度在0.30-0.974之間,表明不同產(chǎn)地的單面針樣品中化學(xué)成分的組成基本一致,但組分的量上存在一定的差異。對(duì)不同產(chǎn)地單面針樣品的指紋圖譜進(jìn)行聚類分析和主成分分析,二者分析結(jié)果基本一致,表明指紋圖譜技術(shù)結(jié)合聚類分析和主成分分析是評(píng)價(jià)不同產(chǎn)地單面針的有效方法之一,可為單面針的質(zhì)量控制提供更全面的參考。
(4)不同來(lái)源單面針HPLC色譜圖的比較。首先對(duì)不同產(chǎn)地的單面針進(jìn)
6、行分析,結(jié)果表明,長(zhǎng)沙、恩施、銅仁、廣西、張家界五個(gè)產(chǎn)地的單面針樣品HPLC圖譜主要峰群的整體面貌基本一致,但各色譜峰的峰高或響應(yīng)值有較大差別;從化學(xué)成分的總體含量上分析,恩施和銅仁的整體品質(zhì)較差,長(zhǎng)沙次之,南寧和張家界產(chǎn)單面針品質(zhì)最好。其次以單面針的根部、莖部及葉(嫩葉、老葉)為研究對(duì)象,初步探討了HPLC色譜圖的不同。葉中更多的含有水溶性或極性較大的成分而根部、莖部更多的含有脂溶性或是極性較小的成分;莖部與根部指紋圖譜相似,化學(xué)成分
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