臍帶血干細(xì)胞玻璃化保存的理論及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該文首次提出了采用玻璃化方法進(jìn)行臍帶血干細(xì)胞保存的思想,并進(jìn)行了相應(yīng)的理論和實(shí)驗(yàn)研究.在理論計(jì)算中,該文采用細(xì)胞脫水、冰晶成核和擴(kuò)散控制的晶核長大三部分耦合模型來研究臍帶血干細(xì)胞在DMSO溶液中進(jìn)行降溫和復(fù)溫過程中胞內(nèi)冰形成的情況.模型預(yù)測和解釋了降溫和復(fù)溫過程中冷卻速率和復(fù)溫速率對(duì)胞內(nèi)冰形成的影響,同時(shí)提出了成功實(shí)現(xiàn)臍帶血干細(xì)胞玻璃化的降溫速率和復(fù)溫速率應(yīng)不低于400℃/min和500℃/min的結(jié)論.在實(shí)驗(yàn)研究中,采用兩步法進(jìn)行臍帶

2、血干細(xì)胞的玻璃化保存.先將含有細(xì)胞的培養(yǎng)液、0.9﹪的NaCl和2.0M的DMSO溶液配制成分別DMSO濃度為1.0M、1.5M、1.75M的臍帶血干細(xì)胞溶液,將配好的玻璃化溶液置于4℃靜置20分鐘使臍帶血干細(xì)胞的玻璃化溶液達(dá)到細(xì)胞內(nèi)外溶液平衡,然后將其投入液氮中大約24小時(shí)左右,最后將液氮中的細(xì)胞取出37℃水浴復(fù)溫,細(xì)胞存活率達(dá)到了80﹪以上.在這一降溫-復(fù)溫過程中,在-100℃~0℃溫區(qū)范圍內(nèi)降溫速率和復(fù)溫速率都在800/min以上