RNA干擾CCR3基因與糖皮質(zhì)激素對變應性鼻炎小鼠模型嗜酸性粒細胞影響的研究.pdf

1、目的：
　　觀察在變應性鼻炎小鼠給予RNA干擾CCR3基因的慢病毒處理后小鼠模型中CD34+細胞及嗜酸性粒細胞變化情況，并通過與糖皮質(zhì)激素對照組的比較，闡述變應性鼻炎的發(fā)病機理并尋找較臨床激素治療更加安全有效的可能方式。
　　方法：
　　將已驗證具有高效特異性、專一性的慢病毒CCR3shRNA（rLV-mCCR3-3）作用于變應性鼻炎小鼠，收集經(jīng)慢病毒CCR3shRNA處理后小鼠的骨髓、血液、鼻黏膜。鼻黏膜 HE染色并

2、通過免疫組化方法檢測 CD34+細胞的浸潤情況。聚合酶鏈式反應RT-PCR檢測小鼠骨髓、血液及鼻粘膜中嗜酸性粒細胞CCR3及其陽性離子mRNA的表達及改變。
　　結(jié)果：
　　1、小鼠鼻粘膜上CD34+細胞浸潤情況有差異，CCR3shRNA處理組、激素對照組、與正常對照組中上 CD34+細胞數(shù)可見明顯少于 PBS組和ShRNA組（P<0.05），具有統(tǒng)計數(shù)意義，正常對照組中CD34+細胞少于CCR3shRNA處理組、激素對照組

3、。CCR3shRNA處理組中的CD34+細胞稍低于激素對照組之間，但不具有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2、在RT-PCR檢測小鼠骨髓、血液及鼻粘膜中嗜酸性粒細胞CCR3及其陽性離子mRNA的表達結(jié)果中，CCR3shRNA處理組中的嗜酸性細胞的CCR3及多種陽離子蛋白（主要堿性蛋白(MBP)、陽離子蛋白(ECP)、過氧化物酶(EPO)）在3種組織中的表達量都明顯ShRNA組及PBS對照（P<0.05），CCR3shRNA處理組

4、mRNA表達量低于激素組，但都無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　本實驗通過特異性高、專一性的基因沉默CCR3有效的降低小鼠變應性鼻炎中嗜酸性粒細胞浸潤，進一步證實了CCR3信號通路在變應性鼻炎中致病機制發(fā)揮重要作用，能夠有力的抑制EOS遷移及浸潤，達到減少EOS分泌脫顆粒，從而減輕炎癥程度，改善變應性鼻炎癥狀，甚至可能治愈鼻炎。目前沉默CCR3與糖皮質(zhì)激素都能在一定程度上抑制嗜酸性粒細胞的表達，沉默CCR3可能