A型肉毒素治療瘢痕疙瘩頑固性痛癢和預(yù)防瘢痕增生攣縮的可行性研究.pdf

1、研究目的：探索治療瘢痕疙瘩頑固性痛癢的新方法及局部應(yīng)用A型肉毒素改善創(chuàng)面愈合質(zhì)量和預(yù)防瘢痕增生的可行性。 研究方法： 1.經(jīng)多次常規(guī)激素治療后痛癢無明顯改善的瘢痕疙瘩患者27例，僅接受過激素治療。隨機(jī)單盲分組，BTA注射組(T組，12例)和得寶松注射組(C組，15例)。隨訪1次/月，記隨訪次數(shù)為n(n=0～6)。采用VAS量表評(píng)估痛癢癥狀的變化，記為V隨訪次數(shù)，統(tǒng)計(jì)分析V值，評(píng)價(jià)療效。療程結(jié)束后，切除部分患者(T組7例，

2、C組8例)瘢痕進(jìn)行免疫組化檢測(cè)SP表達(dá)情況。 2.40只SD大鼠隨機(jī)分為C組(無注射，對(duì)照組)和T組(BTA注射組，2U/創(chuàng)面)。BTA預(yù)注射后l周，建立大鼠創(chuàng)傷模型。測(cè)量術(shù)后3d和7d的創(chuàng)面面積。分別在BTA預(yù)注射后第7天(術(shù)前)、術(shù)后3天、術(shù)后7天和術(shù)后14天時(shí)，收集兩組創(chuàng)面皮膚標(biāo)本。real-timePCR檢測(cè)皮膚組織中SP、CGRP、TGF-β1和α-SMA的mRNA表達(dá)。免疫組化和圖像分析技術(shù)檢測(cè)上述4種物質(zhì)免疫陽性染

3、色的積分吸光度A值。 3.18只日本大耳白兔，隨機(jī)分為瘢痕組(S組)和給藥組(T組)共12只以及空白組(B組)6只。建立兔耳增生性瘢痕模型，術(shù)后28天，收集標(biāo)本，分別進(jìn)行HE染色、real-time PCR、western-blot檢測(cè)和細(xì)胞培養(yǎng)。分別檢測(cè)瘢痕增生指數(shù)HI、標(biāo)本中SP、TGF-β1和α-SMA的mRNA含量、膠原I、III和α-SMA的蛋白表達(dá)和成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期。 研究結(jié)果： 1.治療后，A型

4、肉毒素注射組(T組)各觀察點(diǎn)的VAS值逐步下降，至首次注射后6個(gè)月，V6下降了59.60％，痛癢癥狀得到明顯減輕。而得寶松注射組(C組)各觀察點(diǎn)的VAS值較VO無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。T組標(biāo)本中SP的積分吸光度A值較C組顯著減少。 2.A型肉毒素預(yù)注射組(T組)各時(shí)相點(diǎn)SP、CGRP、TGF-β1和α-SMA的免疫組化吸光度A值均較未注射組(C組)，顯著降低。與C組相比，T組四種物質(zhì)的mRNA表達(dá)在各時(shí)相點(diǎn)下均出現(xiàn)不同程度減少，且術(shù)后3天

5、時(shí)差異顯著。C、T組四種物質(zhì)的蛋白表達(dá)隨時(shí)間變化的趨勢(shì)與各自的mRNA變化趨勢(shì)基本一致。 3.A型肉毒素注射組(T組)SP、TGF-β1和α-SMA的mRNA含量較瘢痕組(S組)顯著降低，但均高于空白組(B組)；三組的α-SMA/β-actin蛋白印跡密度比值組間比較有顯著差異，且S組>T組>B組；T組的膠原I、III蛋白表達(dá)和膠原I/III比值顯著低于S組。與S組相比，T組處于增殖期的細(xì)胞明顯減少，相應(yīng)分布于靜止期G0-G1的

6、細(xì)胞明顯增多。 研究結(jié)論： 1.A型肉毒素注射能顯著減少瘢痕組織內(nèi)的SP含量，減輕瘢痕疙瘩的頑固性痛癢，且療效具有時(shí)間依賴性； 2.①局部皮下預(yù)注射A型肉毒素不影響創(chuàng)面愈合的時(shí)間和速度；②在mRNA和蛋白水平上，A型肉毒素可減少SP、CGRP、TGF-β1和α-SMA的表達(dá)，且術(shù)后3天是BTA抑制四種物質(zhì)mRNA表達(dá)的主要時(shí)期，這一作用至少可以維持14天； 3.①創(chuàng)傷后即刻，局部應(yīng)用A型肉毒素不影響兔耳創(chuàng)