血漿miRNAs預(yù)測(cè)結(jié)腸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和化療耐藥性研究.pdf

1、第一部分血漿miRNAs預(yù)測(cè)結(jié)腸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和化療耐藥性研究
　　目的:在臨床中，結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移和耐藥性的預(yù)測(cè)十分重要，但是卻沒(méi)有一定的標(biāo)準(zhǔn)。本研究旨在調(diào)查血清miRNAs的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)是否可以預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)移、耐藥性和預(yù)后。
　　方法:研究采用實(shí)時(shí)PCR方法在手術(shù)和化療后的不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)定15例結(jié)腸癌患者的血清miR-155、miR-200c和miR-210水平，為期3年。
　　結(jié)果:與健康受試者相比，我們觀察到結(jié)腸癌患者的血清和腫瘤組

2、織中miR-155、miR-200c和miR-210的水平明顯增高。研究將手術(shù)和化療之后的3年隨訪期間預(yù)后良好患者的血清miRNAs水平達(dá)到健康對(duì)照組血清miRNAs水平。復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移患者的血清miR-155、miR-200c和miR-210維持在一個(gè)較高的水平上或在降低后短時(shí)間內(nèi)又再次升高。在化療緩解良好的轉(zhuǎn)移性腫瘤患者中，miR-200c和miR-210的再次升高比miR-155更為顯著。與此相反，在化療耐藥型患者中，miR-15

3、5的再次升高比miR-200c和miR-210顯著。
　　結(jié)論:本研究表明，結(jié)腸癌手術(shù)和化療后再次升高或保持較高的血清miR-155水平是化療耐藥性的一個(gè)標(biāo)志，而高和/或重新升高的miR-155、miR-200c和miR-210水平則預(yù)示了腫瘤的局部復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后。
　　第二部分miR-200c在結(jié)腸癌中的作用及相關(guān)分子機(jī)制研究
　　背景:miR-200c的表達(dá)已被廣泛報(bào)道在腫瘤組織和大腸癌患者的血清中升高，

4、并已發(fā)現(xiàn)與預(yù)后較差相關(guān)。然而，miR-200c如何調(diào)節(jié)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡，存活，侵襲，轉(zhuǎn)移以及腫瘤生長(zhǎng)仍有待闡明。
　　目的:本研究旨在探討了miR-200c在結(jié)腸癌發(fā)展的作用和相關(guān)機(jī)制。
　　方法:通過(guò)實(shí)時(shí)PCR測(cè)定101結(jié)腸癌患者腫瘤組織及腫瘤周圍組織中miR-200c的表達(dá)，沉默結(jié)腸癌HCT-116和HT-29細(xì)胞miR-200c的表達(dá)以對(duì)miR-200c的反義mRNA的腺病毒進(jìn)行表達(dá)。Westemblot檢測(cè)PTEN，p

5、53的Ser15， PP1和蛋白水平的活化的caspase-3在HCT-116和HT-29細(xì)胞的表達(dá)作用。
　　結(jié)果:miR-200c在結(jié)腸癌患者腫瘤組織的表達(dá)顯著高于其癌旁組織。TNM分期，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和結(jié)腸癌的侵襲與miR-200c的表達(dá)升高顯著相關(guān)。沉默的miR-200c的表達(dá)顯著誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制長(zhǎng)期生存，侵襲和轉(zhuǎn)移，延遲異種移植腫瘤在HCT-116和HT-29腫瘤細(xì)胞中的生長(zhǎng)。重要的是，沉默的miR-200c的表達(dá)可使Ar