志賀菌耐藥性和耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的： 1．了解溫州地區(qū)志賀菌流行的主要血清型及耐藥情況，為臨床藥物選擇提供依據(jù)。 2．研究溫州地區(qū)志賀菌的耐藥基因攜帶情況，分析其與抗菌藥物敏感性的關(guān)系，為預(yù)防和治療志賀菌感染提供依據(jù)。 方法： 1．菌株來源：2006年6月～2008年6月從溫州地區(qū)不同醫(yī)院門診或住院腹瀉患者糞便標(biāo)本分離得到志賀菌共116株，其中中西結(jié)合醫(yī)院57株、溫州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院34株、溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院22株、平陽縣第二人

2、民醫(yī)院3株。藥敏試驗(yàn)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)參考菌株為大腸埃希菌（ATCC25922）。 2．耐藥性檢測：進(jìn)行萘啶酸（NA）、諾氟沙星（NOR）、環(huán)丙沙星（CIP）、左氧氟沙星（LEV）、氨芐西林（AMP））、哌拉西林（PRL）、特治星（TZP）、頭孢吡肟（FEP）、頭孢他啶（CAZ）、頭孢噻肟（CTX）、美洛培南（MEM）、亞胺培南（IPM）、氯霉素（CMP）、復(fù)方新諾明（SMZ）十四種抗菌藥物的敏感性試驗(yàn)，常規(guī)藥敏試驗(yàn)采用K-B法。

3、 3．耐藥基因檢測：取上述志賀菌中復(fù)蘇存活的志賀菌57株，用PCR方法進(jìn)行喹諾酮耐藥基因及Ⅰ、Ⅱ類整合子和耐消毒劑基因qacE△1-sulⅠ的檢測。用紙片擴(kuò)散確證法對57株志賀菌進(jìn)行ESBLs表型篩選，并進(jìn)行TEM、SHV、PER、VEB、GES、CTX-M-1、CTX-M-2、CTX-M-8、CTX-M-9、OXA-10等9種ESBLs基因檢測。 結(jié)果： 1．菌型分布116株志賀菌中宋內(nèi)志賀菌28株占24．1％；福氏志

4、賀菌80株占68．9％，痢疾志賀菌8株占6．9％。在福氏志賀菌中，血清1a型占3．8％（3/80），血清1b型占2．5％（2/80），血清2a型占15．0％（12/80），血清2b型占12．0％（10/80），血清4a型占5．0％（4/80），血清4b型占2．5％（2/80）血清4c型占52．5％（42/80），血清x變異型占5．0％（4/80），血清y變異型占1．2％（1/80）。 2．耐藥情況志賀菌對亞胺培南、美洛培南的敏感

5、率為100．0％；其次為頭孢三、四代藥物，敏感率70％左右，但頭孢噻肟敏感率僅25．2％；喹諾酮類的敏感率60％左右，但萘啶酸敏感率僅9．5％；哌拉西林敏感率30．1％：復(fù)方新諾明、氨芐西林敏感率10％左右。其中喹諾酮類對宋內(nèi)志賀菌有很好的敏感性。本研究檢到一例僅對亞胺培南、美洛培南和特治星敏感的多重耐藥痢疾志賀菌。 3．質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮耐藥基因檢測對57株志賀菌進(jìn)行耐藥基因qnrA、qnrB、qnrS、aac（6'）-Ib檢測，

6、其中53號(hào)菌株檢測到qnrB陽性，13號(hào)菌株檢測到qnrS陽性。 4．Ⅰ類整合子、Ⅱ類整合子和耐消毒劑基因檢測Ⅰ類整合子、Ⅱ類整合子、耐消毒劑基因qacE△1sulⅠ的檢出率分別為64．9％、59．7％和15．8％。Ⅰ類整合子陽性組志賀菌對萘啶酸、氨芐西林、氯霉素的耐藥率均明顯高于Ⅰ類整合子陰性組（P<0．05）；Ⅱ類整合子陽性組志賀菌對氨芐西林、頭孢噻肟、氯霉素和復(fù)方新諾明的耐藥率均明顯高于Ⅱ類整合子陰性組（P<0．05）；同

7、時(shí)檢到Ⅰ、Ⅱ類整合子組萘啶酸、氨芐西林、頭孢噻肟的耐藥率顯著高于檢到單一整合子組和未檢到整合子組（P<0．05）。 5．ESBLs陽性率達(dá)33．3％，基因分型結(jié)果：TEM型1例、CTX-M-9型7例、OXA-10型4例。ESBLs陽性組Ⅱ類整合子的陽性率為79．0％顯著高于陰性組50．0％（P<0．05），qacE△1-sulⅠ基因的陽性率為31．6％也顯著高于陰性組7．9％（P<0．05）。 結(jié)論： 1．溫州地

8、區(qū)志賀菌感染以福氏志賀菌和宋內(nèi)志賀菌為主，福氏志賀菌中以福氏4c型為主，其次為血清2a型和2b型。 2．志賀菌對抗菌藥物的耐藥性受口服藥物的影響大，常用藥物的耐藥性高。臨床醫(yī)生應(yīng)當(dāng)合理使用抗菌藥物，減輕抗菌藥物對志賀菌的壓力，減少耐藥菌株的出現(xiàn)。 3．志賀菌ESBLs陽性率高達(dá)33．3％，由于ESBLs可通過質(zhì)粒傳遞耐藥性，而細(xì)菌性痢疾患者大多來自門診，疾病預(yù)防控制部門應(yīng)加強(qiáng)社區(qū)管理，加大監(jiān)測力度，遏制產(chǎn)ESBLs志賀菌

9、株的感染和擴(kuò)散。 4．喹諾酮藥物長期作為胃腸道感染治療的首選藥物，其對志賀菌的耐藥率達(dá)40％以上，耐藥質(zhì)粒的存在，可加速耐藥性的發(fā)展。本研究志賀菌中質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮類耐藥基因的檢出，為耐藥性的進(jìn)一步傳播提出了警示。 5．消毒劑在日常用品及養(yǎng)殖業(yè)中的廣泛應(yīng)用，使得志賀菌的耐消毒劑基因qacE△1-sulⅠ的攜帶率高，對醫(yī)療消毒形成了新的挑戰(zhàn)，整合子可促進(jìn)耐消毒劑基因的誘導(dǎo)產(chǎn)生。醫(yī)療部門應(yīng)及時(shí)監(jiān)測耐消毒劑基因，并及時(shí)在選用消毒